鲜精低温保存技术的研究与应用前景有关.docVIP

鲜精低温保存技术的研究与应用前景赵玉民　鲍志鸿　马惠海　 杨德新　巩俊明　李峰　　摘　要　0－4℃条件下，经过技术处理的绵羊精子存活时间可达167小时，在77小时之内活率可达70%，应为可授配临界时间。建立以低温保存鲜精（0-4℃保存）人工授精技术为主体的肉羊繁殖改良技术体系，是提高优秀种羊利用率的有效方式。　　关键词 　精液　低温保存　存活时间 　　随着牧业产业化的发展，生产优质肉羊是适应国际和国内市场的需要，而我国的肉羊业起步较晚，目前还没有形成肉羊的繁育体系，品种多为地方品种，产肉性能差，羊肉的品质也较低，市场的竞争力较弱。从20世纪80年代起，我国养羊业陆续引进了国外的优质肉羊品种，来改良我国地方绵羊，提高其产肉率和羊肉的品质，为我国绵羊提质增肉做了巨大的贡献。　　目前我国已引入了德国肉用美利奴、南非肉用美利奴、杜泊、萨福克、特克赛尔、无角道塞特等优质肉羊品种，利用引入的肉羊品种改良当地绵羊品种，取得了较好的效果。为了提高引进肉用种公羊的利用率，迅速扩大肉用羊的繁育数量，采用鲜精低温保存的方法进行人工授精是直接有效的方法。鲜精低温保存技术大大延长了肉羊精子的存活时间，提高了优良种公羊精液的利用率，扩大了配种范围。　　1　鲜精低温保存技术的研究　　1.1　鲜精低温保存后精子活力的种间差异的研究　　实验地点：双辽市牧业科技园区、双辽市光明现代牧业发展有限公司　　时间：2003年8－10月　　内容与结论：在相同的饲养管理条件下，选择特克赛尔、德国肉用美利奴羊、澳洲美利奴羊，分别采精并稀释后低温保存，每隔6小时镜检精子活率，进行10次重复实验。数据结果经方差分析差异不显著。　　其它品种间是否具有差异需进一步进行研究。　　1.2　种公羊饲养管理对精液质量的影响的研究　　实验地点：双辽市牧业科技园区、双辽市光明现代牧业发展有限公司　　时间：2003年8－10月　　内容与结论：品种选用特克赛尔，选择4种饲养管理模式， 1，放牧＋补饲精料，日粮粗蛋白约10%，每隔1日补饲1只鲜鸡蛋，适量胡萝卜；2、全饲舍，补饲精料，日粮粗蛋白约10%，每隔1日补饲1只鲜鸡蛋，适量胡萝卜；3、放牧＋舍饲，不补饲精料，饲喂黄贮及干草，日粮粗蛋白约7%。4、全舍饲，不补饲精料，饲喂黄贮及干草，日粮粗蛋白约3%。　　经10次重复实验，不同饲养管理模式下种公羊精液质量平均值如下表： ? 采精量（ml） 低温处理前活率 低温处理后精液存活时间（h） 模式1 1.5 99% 167 模式2 2 80% 130 模式3 1 95% 167 模式4 1.2 83% 126 　　因此，种公羊的饲养管理对鲜精低温保存效果的影响极大，种公羊在保证营养水平的前提下，运动很重要，相对而言，饲养管理模式1较为理想。运动量与营养水平的最佳值还需进一步研究。　　1.3　稀释液配方的筛选　　在鲜精低温保存技术中，稀释液直接影响精子存活能力，起决定性作用，因此对稀释液配方进行了筛选实验。　　1.3.1　材料与方法　　1.3.1.1　鲜精来源　　双辽市牧业局引入的优质肉羊品种特克赛尔。　　1.3.1.2 精液采集方法　　选取体质健康，性欲旺盛的种公羊，利用假阴道按常规方法采集精液，采出后的精液集精瓶盖严避光恒温，20分钟内送往实验室400倍镜检活率，镜检温度35℃。　　1.3.1.3 低温稀释液的制作：　　在常规稀释液的基础上，进行改进后分别制做A、B、C三种稀释液，其中B液为牛奶稀释液。　　A稀释液 溶液过滤后蒸煮20min灭菌。冷却到30℃，抽取鲜鸡蛋黄20ML注入上述溶液，充分混匀。　　B牛奶稀释液 鲜牛奶用脱脂纱布过滤后，煮沸10分钟，冷却至30℃吸取中间的奶液作稀释液用。　　C稀释液 灭菌后，抽取新鲜的鸡蛋黄20ml注入到上述溶液中。　　以上稀释液各加入青霉素10万IU、链霉素0.1克。　　1.3.1.4 精液稀释 在30℃水浴内对精液按1：3倍稀释，将稀释液沿集精瓶壁缓慢注入，轻轻转动，使之混合均匀，不能过快，防止发生稀释性休克。　　1.3.1.5 降温保存 精液稀释分装后，用16层纱布或脱脂棉包裹容器，并以塑料袋包装密封防水，然后置于0-4℃的恒温冰箱中。　　1.3.2 实验结果　　1.3.2.1 实验一　　稀释液预先配制好，精液来自一只特克赛尔种公羊，原精量1.0毫升，镜检精子活率98%。原精分成3份，分别用A、B、C三种稀释液3倍稀释，0-4℃冰箱低温保存。精液存活时间、活率的变化如下表： ? A稀释液 B牛奶稀释液 C稀释液 6h 98% 95% 98% 12h 95% 83% 95% 18h 93% 82% 93% 24h 89% 75% 90% 30h 88%