【2018年必威体育精装版整理】植物组织培养与器官培养.pptVIP

第3章 植物组织与器官培养 植物组织培养：将离体的植物组织（器官、细胞、胚胎、原生质体）等在适当的培养条件，长成完整植株的技术。{诱发产生愈伤组织、潜伏芽} 植物器官培养： 将诱导的或植株 上原有的各种器官， 放在无菌的人工环境 中让其进一步发育， 最终长成幼苗或大量繁殖的过程。 植物离体无性繁殖 简称离体繁殖（in vitro propagation)、微型繁殖（micropropagation)，是指利用离体培养技术将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，并在短期内获得大量遗传性一致的植株的方法（技术）。 用这种方法得到的植株群体称单株无性系。(来自一个单株（或一个单芽），它们遗传组成相同) 植物离体无性繁殖的意义（优越性） 植物离体无性繁殖的方式 器官发生型(organogenesis type) 胚状体发生型(embryogenesis type) 不定芽型（adventitious bud type) 器官型(organ type) 原球茎型(protocorm type) 球茎芽型 块茎型 鳞茎型 孢子型 根茎型 微枝扦插型 器官发生型(organogenesis type)： 诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根再生成植株的方式。 技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致。 特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。 胚状体发生型(embryogenesis type)： 指植物器官、组织和细胞外植体经培养脱分化形成胚状体再成苗的方式。 技术关键：提高不同外植体胚状体发生及萌发率和提高胚状体同步化率。 特点：胚状体发生数量多、速度快、结构完整，繁殖系数高；遗传性稳定。 不定芽型（adventitious bud type)： 选取具有顶芽和腋芽的短枝无菌培养，诱导芽萌发成苗或增殖产生许多不定芽发育成苗，将新萌生的枝条再转接继代，重复芽到苗的增殖过程，最后使其生根形成植株的方式。 技术关键：打破顶端优势，促使腋芽增殖并促其生根。 特点：繁殖率高、保持物种的遗传稳定性，多用于林木的繁殖。 器官型(organ type) 指直接从茎、叶、鳞片等外植体上诱导不定芽或带芽的休眠器官（如小鳞茎、小球茎、小块茎）产生再生成植株的方式。 技术关键：对培养基要求高，控制好激素浓度，避免愈伤组织发生。 优点：繁殖率高，速度较快；遗传性稳定。 原球茎型(protocorm type) 兰属特有的方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。 块茎型 叶片或叶柄上形成粒状芋块，进一步分化出芽和根 块茎芽可为繁殖系母体，不断切割繁殖移栽，成活率高 。 花叶芋 鳞茎型 鳞片近轴面或边缘直接形成带根的小鳞茎 在试管内形成小鳞茎需较长时间 百合 郁金香 孢子型 用成熟或未成熟的孢子进行培养 孢子繁殖最困难的是表面消毒，萌发时间较长 地钱 根茎型 蕨类具有横向的茎及直立的短根茎，为组织培养的最佳外植体 根状茎上产生蕨叶及根，繁殖速度较孢子型快 肾蕨等 3.1.3 培养基 3.1.3.1 无机盐 3.1.3.1 无机盐 3.1.3.2有机物 氨基酸类 重要的有机氮源 维生素类 以辅酶形式参与植物细胞代谢活动，对生长、分化具有很好的促进作用 vb1， vb6 糖类 主要的碳源—蔗糖？ 天然有机添加物类 CM（椰乳）、马铃薯汁、酵母提取液（YE）、番茄汁等 3.1.3.3 调节物质 （一）生长素类 促进细胞伸长生长和分裂、诱导愈伤组织形成、促进生根，与一定量的细胞分裂素配合可诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长、胚状体的产生等。 常用的有2,4-D、NAA、IBA、IAA IAA为天然植物生长素，见光易分解，高温高压易受破坏； 2,4-D有抑制芽形成的作用，一般用于细胞启动脱分化阶段； 诱导分化则用NAA、NBA或IAA。IBA诱导生根效果最好。 （二）细胞分裂素类 促进细胞分裂、诱导愈伤组织或器官分化不定芽、解除顶端优势而促进侧芽增殖、抑制离体组织或器官衰老。 常用的有6-BA、 KT 、 ZT 3.1.3.4 植物细胞工程培养基配制 培养基母液的配制 大量元素一般配成10倍浓度的母液； 微量元素和有机营养常配成100倍浓度的母液； 混合定容时，注意药剂的添加顺序及稀释度，以免沉淀； 生长调节类物质不溶于水,需用不同溶剂进行溶解 单独配制的试剂： 铁盐与EDTA CaCl2 以KNO3为例 在配制培养基时，取10ml，10ml×0.19g/ml=19g 3.1.3.4 植物细胞工程培养基配制 培养基配制过程