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09.1正交试验
Fe3O4/Au磁粒包被蛋白的条件优化
双月工作汇报------胡佳
1. Introduction
2. orthogonal design and experiment
3. orthogonal analysis-ANOVA
4. Conclusion
正交试验设计
正交试验设计是利用“正交表”进行科学地安排与分析多因素试验的方法。
优点
能在很多试验方案中挑选出代表性强的少数几个试验方案。
通过这少数试验方案的试验结果的分析,推断出最优方案。
同时还可以作进一步的分析,得到比试验结果本身给出的还要多的有关各因素的信息。
正交表是一种特别的表格,是正交设计的基本工具。它的记号、特点和使用方法。
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第一步:确定目标、选定因素、确定水平
Level
Factor A
Factor B
Factor C
Factor D
Coupling buffer
Antibody
concentration
(mg/mL)
Coupling time
(min)
pH
1
0.01 M PBS
1.0
20
7.0
2
0.02 M Tris-HCl
1.5
30
8.0
3
0.01 M CBS
2.0
40
9.0
目标:考察包被缓冲液、抗体包被浓度、pH和包被时间对蛋白包被量的影响
第二步:选择适当的正交表
这是一个四因素两水平的正交试验及分析问题,因此要选择Lq(3s)型的表。
不考虑交互作用,s=4,L9(34)是满足条件的最小的正交表。故选择正交表L9(34) 。
第三步: 表头设计、确定试验方案
列号
1
2
3
4
因子
A
B
C
D
表头可设计为
experimental L9 (34) orthogonal array for Fe3O4/Au particles
Trial
Control factors and levels
Coupling amount
(mg)
Coupling buffer
Antibody
concentration
(mg/mL)
coupling time
(min)
pH
1
PBS
1.0
20
7.0
0.542
2
Tris-HCl
1.5
30
7.0
2.178
3
CBS
2.0
40
7.0
1.259
4
PBS
1.5
40
8.0
0.814
5
Tris-HCl
2.0
20
8.0
1.897
6
CBS
1.0
30
8.0
1.522
7
PBS
2.0
30
9.0
1.135
8
Tris-HCl
1.0
40
9.0
1.371
9
CBS
1.5
20
9.0
1.392
第四步 分析正交试验结果
确定最优方案
确定因素的主次顺序
方法1 直观分析(极差分析)
(1)计算极差,确定因素的主次顺序
第j列的极差
极差越大,说明这个因素的水平改变对试验结果的
影响越大,极差最大的那个因素,就是最主要的因素。
对本实验来说,各因素的主次顺序为
ACBD
(2)确定最优方案
不考虑交互作用,则根据各因素在各水平下的
平均包被量的高低确定最优方案;如果考虑交互
作用,则取各种搭配下包被量的平均数,按优化标准确定
最优方案。
本例中,不考虑交互作用,在方案A2B2C2D2最优,
故本问题的最优方案为A2B2C2D2。
方法2 方差分析法
基本思想与双因素方差分析方法一致:将总的
离差平方和分解成各因素及各交互作用的离差平方
和,构造F统计量,对各因素是否对试验指标具有
显著影响,作F检验。
正交试验的方差分析
Variation source
A.Coupling buffer
B.Antibody concentration
C.coupling time
D.pH
Total
Degrees of freedom
2
2
2
2
8
Sum of squares
1.46
0.18
0.34
0.02
2.01
Variance ratio(F)a
8.04
0.30
0.62
0.03
Distinctiveness
High marked
Not marked
Not marked
Not marked
Contribution(%)b
14.93
100.00
a Critical variance ratio for a 95% confidence level is 5.41.
b contribution is defined as 100×(pooled sum of squres/total sum of squar
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