测序分析的常见故障排除.PDFVIP

测序分析的常见故障排除 Field Application Scientist Tel :800 820 8982/400 820 8982 E-mail: cntechsupport@ The world leader in serving science 1 开始故障排查前… 界定问题 进行对照实验 检查基本要素 利用可用的资源尝试解决问题 2 界定问题 •解决问题之前，需要了解问题类型： - 数据的问题(例如：宽峰、没有分析、进样失败) - 错误提示信息(例如：Injection failed，Instrument is not connected ) - 物理损坏(例如：注射器渗漏、毛细管损坏) - 计算机的问题(例如：不能启动、与仪器通信失败) - 硬件(例如：激光故障、加热炉不能加热到指定温度) 3 进行对照实验 pGEM Control Reaction BigDye® Terminator Ready Reaction Mix 8 µl M13 -21 Primer 4 µl pGEM Control DNA 1 – 2 µl H O 6 – 7 µl 2 用与处理样品同样的方法进行对照实验和纯化 4 进行对照实验 •测序标准品：验证仪器性能。如果失败，通常表明毛细管、胶、缓冲液、 注射器、缓冲液托盘、septa 、塑料制品或者硬件可能出现问题。 •pGEM Control DNA: 验证仪器性能和测序过程。如果pGEM Control DNA 测序失败而标准品测序通过，可能测序试剂盒、PCR仪、纯化步骤、引 物或者DNA模板存在问题。 • 内对照：验证引物、PCR扩增以及模板。如果测序标准品和pGEM control 测序成功，那么可能是模板DNA 、用于PCR扩增的引物或者是模板的纯化出 现问题。 5 检查基本要素 请注意以下问题： • 检查计算机和仪器是否已经通电（LED灯、风扇、UPS是否正常运行） • 移除并且检查电线是否磨损 • 完全切断系统的电源，重新启动可以解决很多存储和连接方面的问题 • 计算机是否联网？是否更改过系统设置(例如：安装新的软件或者改变计算机 的名称) ？ • 如果确认是电路问题，请立即关闭仪器或者切断电源，联系工程师 800 820 8982-4(或者联系UPS 的制造商) 6 利用可用的资源 7 利用可用的资源 • 常见问答：查阅产品的常见问答。点击Ask A Question 标签向技术支 持提交问题 • 工具、教程、维护和故障排查：