渗透剂对苹果酸脱氢酶包含体的复性作用-化工学报.PDFVIP

第 卷 第 期 化 工 学 报 ５８ １１ Ｖｏｌ．５８ Ｎｏ．１１ 　 　 　 　 　　　 　　　 　　　 　　　 　　　　 　 年 月 （ ） ２００７ １１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒ ａｎｄ Ｅｎｉｎｅｅｒｉｎ Ｃｈｉｎａ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２００７ 　 　 　 　 　 　 ｙ　 　 ｇ ｇ　 　 　　 　 檭 殐檭檭檭檭檭殐 檭 研究论文檭 渗透剂对苹果酸脱氢酶包含体的复性作用 殐 殐 檭 檭檭檭檭檭 刘建华，董晓燕，付敏玲，孙 彦 　 （天津大学化工学院，天津 ３０００７２） 摘要：将甜菜碱和海藻糖两种渗透剂作为添加剂，考察了其促进苹果酸脱氢酶包含体的复性作用。结果显示， 甜菜碱和海藻糖均可有效促进大肠杆菌苹果酸脱氢酶包含体的复性。在本文实验条件下，随添加甜菜碱浓度的 升高，复性后苹果酸脱氢酶的比活增大；而海藻糖则出现最佳添加浓度使复性后苹果酸脱氢酶的比活最大；同 时在盐酸胍浓度较高、不添加渗透剂时复性效果较差的复性体系中，若添加合适浓度的甜菜碱或海藻糖即可有 效促进苹果酸脱氢酶的复性，显示出渗透剂作为添加剂在实际包含体蛋白质复性过程中的应用前景。另外，通 过外源荧光分析发现，添加甜菜碱和海藻糖均可降低苹果酸脱氢酶表面疏水性区域的暴露程度；圆二色光谱分 析则表明，甜菜碱和海藻糖可以促进苹果酸脱氢酶 螺旋结构的生成。  α 关键词：渗透剂；大肠杆菌苹果酸脱氢酶；复性； 苯胺基萘 磺酸；圆二色光谱 １ ８ 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｏ６２９．７３ Ｏ６４３．１ Ａ ０４３８－１１５７ ２００７ １１－２８６４－０７ 　　　　 犈犳犳犲犮狋狅犳狅狊犿狅犾狋犲狊狅狀狉犲犳狅犾犱犻狀 狅犳犈犮狅犾犻犿犪犾犪狋犲犱犲犺犱狉狅犲狀犪狊犲 狔 犵 狔 犵 ， ， ， 犔犐犝犑犻犪狀犺狌犪 犇犗犖犌犡犻犪狅犪狀 犉犝犕犻狀犾犻狀 犛犝犖犢犪狀 狔 犵 （ ， ， ， ） 犛犮犺狅狅犾狅 犆犺犲犿犻犮犪犾犈狀犻狀犲犲狉犻狀 犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅 犜犻犪狀犻狀犝狀犻狏犲狉狊犻狋 犜犻犪狀犻狀３０００７２ 犆犺犻狀犪 犳 犵 犵 犵狔 犼 狔 犼 ： （ ） （ ）， 犃犫狊狋狉犪犮狋 Ｒｅｃｏｍｂｉ