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流动相缓冲剂的选择
色谱讲堂(二十七) 流动相缓冲剂的选择 广州太玮生物科技有限公司 市场·技术部 Marketing@ 02062807938 (2014年1月) 色谱讲堂(二十七) 前言 在 《色谱讲堂22期》,我们已经讨论了流动相pH的影 响和如何确定流动相pH值,本期我们继续讨论缓冲剂的 选择。 设计好流动相pH后,我们就需要根据pH有针对性的 选择缓冲剂。 每一种缓冲剂,都有一定的缓冲范围,可以根据其 pKa确定。 之后,确定缓冲剂的浓度。 这是我们的工作思路,分享给大家,只希望对您的工 作有启发。 色谱讲堂(二十七) 常用的缓冲剂关键参数 名称 pKa 推荐范围 可用范围 挥发性 截止波长* TFA <2 <2 <2 YES 210nm 磷酸 pK1 2.1 1.1~3.1 <4.1 NO 200nm 磷酸盐 pK1 2.1 1.1~3.1 <4.1 NO 205nm 磷酸盐 pK2 7.2 6.2~8.2 5.2~9.2 NO 205nm 甲酸 3.8 2.8~4.8 1.8~5.8 YES 230nm 甲酸铵 3.8 2.8~4.8 1.8~5.8 YES 220nm 乙酸 4.8 3.8~5.8 2.8~6.8 YES 230nm 乙酸铵 4.8 3.8~5.8 2.8~6.8 YES 220nm 枸橼酸盐 pK1 3.1 2.1~4.1 1.1~5.1 NO 230nm 枸橼酸盐 pK2 5.4 4.4~6.4 3.4~7.4 NO 230nm *注:截止波长与实际使用浓度有关,此栏数据是按照HPLC流动相常用浓度 的经验值,有些可能与文献不符。
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