血栓与止血检验的基本方法PPT.ppt

第十三章 血栓与止血检验基本方法;教学要求 1.掌握PT时间、APTT 、3P试验、FDPs、血浆D-二聚 体等试验的检测的原理及临床意义、正常吸附血 浆、正常血清所含的凝血因子、过敏性紫癜、ITP 、DIC、Even综合征的概念及临床表现，过敏性紫 癜的主要过敏原、ITP的诊断标准，血友病诊断和 分型。 2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测的意义、 血栓与止血筛选试验的应用，过敏性紫癜、ITP、 血友病、DIC、Even综合征的实验室检查。 3.了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性 检测和血栓前状态检测的意义、其他凝血障碍性 疾病的检验。;;;(一)血浆凝血酶原时间测定（PT） 1.原理 在受检血浆中加入足量组织凝血活酶（即TF）浸出液和和适量Ca2+离子后，血浆凝固所需的时间称为血浆PT。 ;2.参考值 (1)平均为12s±1s,男性：11s～13.7s； 女性：11s～14.3s，超过对照3s以下为异 常。 (2)PT时间比值（PTR）=被检血浆PT（s） /正 常参比血浆PT（s），宜用多份正常血浆PT 的几何均数参考值为1.00±0.15 (3)国际标准化比值(INR)=PTR[S] 参考值因国际敏感度指数[S]而异。;3.临床意义：是外源性凝血途径的筛选试验。 (1)PT延长 ①Vitk缺乏：Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ统称为依赖Vitk凝 血因子。Vitk↓、因子↓→ PT↑。 ②抗凝治疗，香豆素类抗凝药物与Vitk化学结 构相似，竞争性拮抗，使PT↑。 ③肝病：肝脏是合成除组织因子（Ⅲ）、钙（Ⅳ） 及Ⅷ因子外其他因子的主要场所，肝受损→凝 血因子合成↓→PT↑。 ④先天性凝血因子缺乏症：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ。 ⑤抗凝物质增多。 (2)PT缩短：常见于血栓前状态和血栓性疾病。 ;(二)活化部分凝血活酶时间测定 1. 原理：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和 Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板3 因子，在Ca2+参与下，观察贫血小板血浆凝固 所需的时间，即为活化部分凝血活酶时间 （APTT）。 ;2.参考值 男：37s±3.3s 女：37.5s±2.8s 超过正常对照10s以上为异常。 ;3. 临床意义：是内源性凝血系统敏感而简便的筛 选试验。 (1)APTT时间延长： ①内源性凝血途径因子缺乏：Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。 ②外源性凝血途径因子缺乏：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ。 ③血中抗凝物质增多。 (2)APTT时间缩短：可见于高凝状态及血栓形成 性疾病。;三、纤溶活性的筛查试验 血浆纤溶活性增强的筛查，一般选用能直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）的试验，临床常用的有：凝血酶时间（thrombin time，TT）、血浆鱼精蛋白副凝固试验（plasma protamine pracoagulation test，3P test）。;(一)凝血酶时间测定 1.原理：受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后、血浆凝固所需要的时间，即为凝血酶时间。 2.参考值：16s～18s。超过对照3s以上为异常。; 3.临床意义 (1)TT延长： ①肝素及肝素类抗凝物增多。 ②FgDP(FbDP)↑→DIC(消耗Fb 或Fg)。 ③先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。 (2)TT缩短:极罕见,主要见于某些异常蛋 白血症如巨球蛋白血症。;(二)可溶性纤维蛋白单体试验：3P试验 1．原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasma protamine paracoagulation test,3P test），是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维蛋白单体(FM)与FDP(主要是X片段)形成可溶性复合物解离,游离的FM之间自行聚合呈肉眼可见的纤维絮状或胶冻状沉淀。;2.参考值：阴性 3.临床意义 (1)原发性纤溶时：阴性。 (2)继发性纤溶时早期：阳性。 (3)DIC的晚期因FgDP或FbDP（X、Y）被降解为低分子量小碎片（D、E）：阴性。 ;(三)血浆D-二聚体检测 ——乳胶颗粒浊度分析法 1.原理：受检血浆中加入标有D-二聚体单抗的胶乳 颗粒悬液，如果血浆中D-二聚体含高于0.5mg/L 时即可与胶乳颗粒上的抗体结合，发生胶乳颗 粒凝集。 ;2．血浆D-二聚体