乳品中苯甲酸和山梨酸的测定-北京东西分析仪器有限公司.PDF

北京东西分析仪器有限公司 乳品中苯甲酸和山梨酸的测定 一、 方法提要 山梨酸、苯甲酸是国际粮农组织和卫生组织推荐的高效安全的防腐保鲜剂， 广泛应用于食品、饮料、烟草、农药、化妆品等行业。食品中添加的山梨酸、苯 甲酸若超标严重，在一定程度上会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康。根据 FDA 的规定，苯甲酸在食品中的使用量为0.2~1.0g／kg。但婴幼儿乳制品中不 允许添加。婴幼儿长期摄入苯甲酸也可能带来哮喘、荨麻疹、代谢性酸中毒等不 良反应。但是现在一些婴幼儿奶粉中检测出了山梨酸和苯甲酸含量。 本实验根据《食品安全国家标准—乳品中山梨酸和苯甲酸的测定》中提供的 方法进行分析测定。去除试样中的脂肪和蛋白质，甲醇稀释，过滤后，采用反相 液相色谱法分离测定。 二、试剂及标准溶液配制 2.1 2.1 22..11 试剂 2.1.1 甲醇（CH OH）：色谱纯。 3 2.1.2 亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取亚铁氰化钾[K Fe(CN) ·3H O]106g，用 4 6 2 水溶解于 1000mL 容量瓶中，定容到刻度后混匀。 2.1.3 乙酸锌溶液（183g/L）：称取乙酸锌[Zn(CH COO) ·2H O]219 g，加入 3 2 2 32 mL 乙酸，用水溶解于1000mL 容量瓶中，定容到刻度后混匀。 2.1.4 磷酸盐缓冲液（pH=6.7）：分别称取 2.5g 磷酸二氢钾（KH PO ）和 2.5 2 4 g 磷酸氢二钾（K HPO ·3H O）于 1000mL 容量瓶中，用水定容到刻度 2 4 2 后混匀，用滤膜过滤后备用。 2.1.5 氢氧化钠溶液（0.1mol/L）：称量 4 g 氢氧化钠（NaOH），用水溶解于 1000 mL 容量瓶中，定容到刻度后混匀。 2.1.6 硫酸溶液（0.5mol/L）：移取 30 mL 的浓硫酸（H SO ）到 500 mL 水中， 2 4 边搅拌边缓慢加入，冷却到室温后转移到 1000 mL 容量瓶，定容到刻度 后混匀。 2.1.7 甲醇水溶液：体积分数为 50 %。 2.2 2.2 22..22 标准溶液配制 北京东西分析仪器有限公司 2.2.1 苯甲酸和山梨酸标准贮备液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各 500 μg。 准确称取苯甲酸、山梨酸标准品各50.0 mg，分别置于100mL 容量瓶中，用 2 甲醇溶解，并稀释至刻度。摇匀后，冷藏于冰箱中，有效期 个月。 2.2.2 苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各 10 μg。 分别吸取苯甲酸和山梨酸的标准贮备液各5 mL，至250 mL 的容量瓶中，用 甲醇水溶液定容至刻度后混匀。冷藏于冰箱中，有效期5 d。 三、仪器及工作条件 3.1 3.1 33..11 仪器 3.1.1LC 5500高效液相色谱（HPLC）仪：配有紫外检测器（北东西分析仪器有 限公司）。 3.1.2 分析天平：感量为0.0001 g（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。 3.1.3 超声波水浴（DS6150，Do-Chrom）。 3.1.4 0.45 m 滤膜： μ 。 3.2 3.2 33..22 色谱条件 色谱柱：C18，250 mm×4.6mm ，5μm。 流动相：甲醇—磷酸盐缓冲溶液=1＋4，0.45 μm滤膜