[自然科学]HPLC常见故障分析及其排除方法2010.pptVIP

沈阳天美达科学仪器有限公司 HPLC 常见故障分析 及其排除方法 于孔宪 2004-3-26 宗 旨 集三十余年使用与维护仪器之经验 汇各国仪器常见故障之点滴 ------奉献给祖国的栋梁 天津大学-沈阳化工局-省防疫站-省食品所 -日本岛津-香港天美-自立门户 HPLC流程结构有机结合紧密相关 相对检测器本底低 UV与检测条件相呼应 190nm--220nm近紫外区注意事项 样品浓度与检测器灵敏度 PH值对色谱柱影响 机械杂质、有机杂质 脱气--脱气装置质量 有关流动相常见故障现象 泵前输液管有气泡 脱气 （超声、脱气机） 清洗溶剂滤头 检查输液管是否破损 过滤膜用错—水膜用于有机相 保留时间变化--挥发--吸收 PH值变化 输液泵 在线过滤器 In-line Filter 进样伐---7725i 进样模式 1 部分充满定量管而不浪费样品 2 完全充满定量管 MBB（Make-Before-Break) 断流前之动作 带（i）后缀意味着有内置式触发开关 不推荐用户长时间最高压力下工作 定量管体积 0.1微升-10毫升 最高压力 35-49MPa 详见7725i中文、英文说明书 柱效的关键处 柱前死体积 柱后死体积 色谱柱柱效 混合器 高压梯度混合器 钢珠、搅拌、紊流 优点：不产生气泡 不配脱气机 低压梯度混合器 优点：多元-四元 必须配脱气机 低浓度比例问题 高压混合器 色谱柱 如何选择色谱柱? 1 柱效 塔板数/米 总塔板数 250毫米 70000 17000 200毫米 70000 14000 150毫米 70000 10500 2 柱填料 C18 C8 C6 NH CN …… 3 /china 色谱柱维护 色谱柱安装 保护柱安装 平衡色谱柱 反向柱（C18）用甲醇 乙腈10-20倍 柱体积平衡 250X4.6柱体积约4毫升 注意柱前柱后死体积 连接件 1: SUS 一卡就死 卡过就断 不同柱死体积不同 2:PEEK 承受压力有限 3:SUS-PEEK 优于1 2 色谱柱损坏现象 柱效减低 峰型变矮变宽 保护柱失效 分析柱污染 柱前柱后死体积 分析柱头塌陷 色谱峰出现肩峰 何谓肩峰? 柱连接管断在柱头里 色谱柱受震动 您的色谱柱是否在病态运行? 何谓肩峰？ 是肩峰吗？ 样品前处理--保护色谱柱 液液萃取 液固萃取 固相萃取 上样 纯化 洗脱 洗柱 固相萃取装置--自动化富集 SPE预处理柱 子弹头式 针管式 12孔 24孔式 氮吹仪 --浓缩样品 12孔 24孔式 全自动固相萃取仪 检测器 氘灯损坏 噪声大 检测池污染 噪声大 检测池有气泡 噪声尖大 接地线 噪声大 压力过大 噪声大 压坏镜片 参比池污染 噪声大 清洗残留液 检测池漏液 噪声大 您的检测器噪声如何? 消耗品 流动相 国产甲醇7元/瓶 国产乙腈？元/瓶 进口甲醇210元/瓶4L 进口乙腈1000元/瓶4L 氘灯 SPD-10AVP 3200元/只/2000小时 SPD-10AVP用国产 1500元/只/2000小时 管接头 SUS-PEEK接头 保护柱 国产550元/套（三柱芯） 分析柱 国产1100元/只 柱塞杆清洗 5 仪器噪声？ 工作站 电脑接地？主机接地？输入短路 检测器 污染？ 漏液？气泡？ 色谱柱 污染？ 保护柱 污染？ 进样器 污染？ 针道？针道清洗器？ 在线过滤器 污染？ 泵 污染？ 漏液？ 流动相 与检测器是否匹配？ 工作站 国家药监局要求 不得修改数据的 朔源、原始数据可查 org 进口原装可满足 色谱工作站 噪声大 不采集 不积分 爱死机 你的工作站怎样? 您对交流感觉如何? 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 YL9100 HPLC – Mo