药残检测实验中常见问题与解答.docVIP

问题与解答 药残离心管最理想的洗涤方法，我们发现每次作完回收实验时，离心管就会出现不同程度的污染现象？ 建议实验完成后,先用流动自来水冲洗干净,再超声2h, 然后立即清洗干净 实验中对水质的要求：三蒸水、蒸馏水、纯净水还是去离子水？ 最好用去离子水; 器具污染所造成的途径有几种？ 一: 检样过程中出现含量较高的阳性样品; 二: 实验器具没有清洗干净; 容易被污染的实验器具, 使用周期较长, 建议方便更新的实验器具, 定期(3-5个月)更新一次。 药品的隐含违禁成份用ELISA方法检测是否可行？ 针对不同成分的样品, 通过对应的样品前处理方法,消除干扰后, 可以用ELISA方法进行检测，但应防止与药残实验交叉污染。 同样一个样品，称取两个样检测两次，两次值差别较大，是取样原因还是板间的差异？ 检测中常遇到的问题。 正常情况下,板孔间的变异不会对样本的检测结果造成绝对的影响 样品的取样, 前处理过程和分析过程中的操作误差是影响结果差异较大的主要因素 前处理样品所用的氮气是不是可换用压缩空气？空气中的氧气是否会对样品产生氧化作用，进而影响试验结果？ 可以用压缩空气替换氮气, 药物的氧化在此不会产生 将肉中药物残留成份转移到提取液中，最佳的离心力、离心时间是多少（不同的试剂盒离心时间不一样）？ 组份区别，4500r/min, 离心5min 呋喃唑酮检测孵育时间多长为最佳？ 14到16h（参考仪器方法）,有实验证明过最低可以缩短至8小时,但对于高阳性样本来说可能会出现差异,建议使用14-16h. 回收率的测定方法？每个盒子有一个推荐的回收率测定方法。 不同的试剂盒的不同种类的样本, 按照说明书中样本的前处理方法, 回收率的测定方法也有不同，如硝基呋喃类与喹诺酮类的添加方式等。 脂肪存在为什么会造成试验的假阳性率比较高？ 在提取过程中, 容易造成乳化, 对样本进行不正常的浓缩，易与杂质混合难以分离。 样品OD值落在药残标准曲线的那一区间值精确度最高？ 一般在第三和第四标准之间精确度较高, 但是不同的试剂盒曲线的局部差异, 精确区间会稍有变化。一般在ＩＣ５０左右曲线上的直线段较为准确． 12.OD值偏低由什么因素引起的? 　　　整板ＯＤ值偏低． 反应温度偏低, 反应时间偏少, 洗板时间过长或过多, 点板时间过长, 酶标仪故障,(波长错误；钨光灯寿命将近,导致光强变弱；) 试剂盒有效期已过或将过， 某些试剂盒需要稀释才使用的试剂稀释倍数错误， 试剂变质或污染， 不同批次的试剂盒混用， 试剂盒的回温时间太短， 试剂盒保存环境过于复杂， 试剂盒处于极端条件下，比如放在贴着冰箱壁，试剂冻伤， 　　样本的ＯＤ值偏低． 样本的阳性太高， 某些试剂盒的样本需要调节ＰＨ的没有调节到需要的ＰＨ范围， 某些试剂盒的复溶液需要稀释后才能使用的没有经过稀释， 样本前处理时没有去掉上层有机相，加样吸取到上层有机相， 样本被污染， 样本与标准品的温度相差太多， 样本前处理时使用的去离子水质量不合格， 13.样本的吸光度值为什么会超出曲线上最大ＯＤ值？ 样本在离心以后没有充分回温到室温或未与标准品温度一致， 标准品回温时间不够， 样本中含有非样本基质的物质，如有机溶剂， 样本复溶液稀释错误或直接利用去离子水作为复溶液， 标准１被污染， 边缘效应， 反应时间错误，导致标准品的ＯＤ值不上升而样本的ＯＤ值继续上升， 附：此种情况一般可以说明样本为阴性样本， 14.氮吹仪为什么需要水浴？ 　水浴加热是为了使样本挥发的速度更快一些．