肺炎链球菌的研究检测案例.pptVIP

* * 乳胶凝集试验操作程序1 1.100℃水浴箱系统性加热3分钟 2.3000rpm离心5分钟 3.在每一个环中加入一滴（40~50μl）上清液 4.摇匀乳胶，R9、R6、R7、R1、R2在白环中，R8、R3、R4、R5在黑色环中 * * 5.用混合棒混合标本和乳胶 6.摇动卡片，10分钟内观察每个反应孔的凝集情况，判断结果 乳胶凝集试验操作程序2 * * 荚膜肿胀试验（一） 当一种型特异性的抗体与肺炎链球菌荚膜多糖结合后会引起荚膜折光指数改变，从而使其显得肿胀或更易于观察，这便是荚膜肿胀实验 肺炎链球菌被染成暗蓝色，周围被一圈代表荚膜外缘的边缘清晰的光晕环绕 透过荚膜的光比肺炎链球菌细胞和背景都要亮一些。单个的细胞、细胞对、细胞链，甚至是细胞团块都可以有荚膜肿胀反应。 荚膜肿胀试验是传统的肺炎链球菌分型方法，因为这种方法简单、快速、准确而且花费少。 * * 采用棋盘分型系统就足可以鉴别肺炎链球菌的血清型 全部90种血清型的鉴别，Omniserum血清 (Statens Seruminstitut, Copenhagen, Denmark)可以涵盖所有的肺炎链球菌血清型 在世界上的多数地区，大约90％的由血液或脑脊液中分离到的肺炎链球菌菌株属于23个不同的血清型或血清群中的一种 介绍一种基于12种混合血清的简单的棋盘诊断系统，可对多数肺炎链球菌的血或脑脊液分离株进行分型和/或分群。 荚膜肿胀试验（二） Table 8: Checkerboard System for Typing and/or Grouping of Most Pneumococci Isolated From Blood or CSFa,b (From Reference #9) Existing Pool Type or Group with New Pool Non-Vaccine Related P Q R S T Type or Group A 1 18* 4 5 2 ? B 19* 6* 3 8 ? ? C ? ? ? ? 20 24*, 31, 40 D ? ? 9* ? 11* 16*, 36, 37 E ? ? 12* 10* 33* 21, 39 F ? ? ? 17* 22* 27, 32*, 41* G ? ? ? ? ? 13, 28* Hc 14 23* ? 15* ? 29, 34, 35*, 42, 47* Ic ? ? ? ? ? 25, 38, 43, 44, 45, 46, 48 * * 链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存 内 容 提 要 * * 短期保存： 1.接种于巧克力琼脂斜面（用螺帽试管）35℃过夜培养，保存于4℃，有利于短期保存（一周之内） 2.硅胶包装 永久保存： 1.冻干是保存菌株最方便的方法，因为冻干细菌可以在4℃或-20℃中长期保存，并在运输过程中无不良影响 2.分离物在10%脱脂乳/10%甘油溶液中-70℃冷冻保存 3.分离物在去除纤维蛋白的绵羊血或兔血中-70℃冷冻保存 菌 株 保 存 * * 永久保存 配置10%脱脂乳/10%甘油溶液（V/V） a.在装90ml蒸馏水的长颈瓶A中加10g脱脂奶粉 b.在长颈瓶B中加10ml甘油 c.115℃高压灭菌10分钟 d.趁热混合高压灭菌的长颈瓶A和B的溶液 f.每只冷冻管中加1.0ml脱脂乳溶液共分离物保存 g.-70℃冷冻保存 要求 肺炎链球菌的研究进展 * * 内 容 提 要 链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存 * * 链球菌分类 链球菌属细菌是化脓性球菌的另一大类常见的革兰阳性球菌，排列成双或长短不一的链状。 病原性链球菌引起人类的有各种化脓性炎症。另一些引起人类肺炎，猩红热等重要疾病。 链球菌属中对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌。 * * 1.根据溶血现象 甲型溶血性链球菌：菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，因而这类细菌被称为草绿色链球菌。 乙型溶血性链球菌：菌落周围有2-4mm宽，界限分明，完全透明的无色溶血环，称乙型溶血或β溶血，β溶血环中的红细胞完全溶解。这类细菌致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。 丙型链球菌：不产生溶血