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文章-子宫增重法筛选中药植物雌激素精选
用小鼠子宫增重法筛选淫羊藿等十味中药雌激素样作用的实验研究*
赵丕文 王大伟 王玲巧 牛建昭** 王继峰
(北京中医药大学 北京100029)
【摘要】
目的:通过研究淫羊藿等十味中药对小鼠体重及子宫发育的影响,探讨它们的雌激素样作用。方法:正常昆明种雌性小鼠121只,体重9~12g。随机分为12组(溶剂对照组、阳性对照组和10个中药组),每组9~11只。各组给药4天,于第五天处死动物,之后迅速剥离子宫称取湿重,计算子宫系数;同时,观察小鼠体重在给药前后的变化情况。结果:(1)灌胃淫羊藿能使小鼠的子宫系数明显升高;灌胃肉苁蓉和补骨脂可使动物的子宫系数有所下降;统计学分析表明均有显著性差异(P<0.01);(2)灌胃淫羊藿使小鼠体重增长速度显著升高(P<0.01);灌胃枸杞也可促进小鼠体重增长加速,灌胃肉苁蓉和补骨脂可使小鼠体重增长减慢,但无显著性差别(P>0.05)。结论:淫羊藿能刺激小鼠子宫发育,促进其体重增长,具有一定的植物雌激素活性;肉苁蓉和补骨脂对小鼠子宫发育有一定的抑制效应,其作用机理及其有效成分均需进一步探讨。
【关键词】
植物雌激素、小鼠、子宫系数、体重、淫羊藿
植物雌激素(phytoestrogens)是天然存在于一些植物中、具有雌激素效能的化合物。【1】这些化合物通过与体内雌激素受体(estrogen receptor,ER)结合,发挥其雌激素活性。因子宫组织含有丰富的ERs,所以上述化合物可通过与ERs结合诱发细胞内反应,使子宫的雌激素诱导蛋白含量增加,从而刺激子宫的生长。因此,子宫增重实验可用于对植物雌激素进行初步筛选。【2】
长期以来,许多中草药及其复方被广泛应用于妇科病的治疗和保健。中药所含植物雌激素在其中发挥的药效作用不容忽视。【3】在本实验中,我们分别对淫羊藿等十种中药——包括淫羊藿、红花、女贞子、枸杞、甘草、肉苁蓉、补骨脂和菟丝子等八种补益药及川牛膝、丹参等两种活血化瘀药【4】进行了筛选,探讨了其雌激素样的作用及其强度。同时,我们也观察了用药前后小鼠体重增长速度的变化。
【材料和方法】
实验材料
实验动物
昆明种小鼠121只,雌性,出生后21天(刚断乳),体重9-12g,购自维通利华实验动物中心。实验期间饲喂在二级动物室,温度(25±1)℃。
药物
红花、女贞子、枸杞、甘草、肉苁蓉、淫羊藿、补骨脂、菟丝子、川牛膝、丹参等十种中药为免煎剂,江阴天江药业有限公司生产,购自东直门医院中药房。实验时用双蒸水溶解,浓度为25g生药/100ml水。阳性药物为己烯醇酚,北京益民药业有限公司生产,配制成3mg/100ml水的悬浊液。
仪器
电子读数分析天平;普通手术器械。
实验方法
* 本课题属于国家自然科学基金(No.,北京市自然科学基金(No. 7032024)资助项目,国家中医药管理局科研课题,02-03ZP 07.
** 责任作者
2.1 分组
将实验动物按体重均衡和随机的原则分为12组:正常对照组、阳性对照组以及十个中药组。
2.2 给药方法
实验动物到达后适应性饲养6天,开始实验。正常对照组给予等体积蒸馏水;阳性对照组按0.35 mg /10g体重/天给药;十个中药组按30mg生药/10g体重/天给药。灌胃分早、晚两次进行,给药均持续4天。
指标观察
3.1 取材、称重
各组动物于最后一次给药后第二天称重,断颈处死后迅速抛开腹腔,分离、剪下子宫称重;计算子宫系数(即:子宫湿重 / 体重×100%),并计算给药前后体重变化率。
3.2 数据统计
实验结果均用±s表示,用t检验进行统计学处理。
【结果】
淫羊藿等十种中药对性未成熟小鼠子宫湿重的影响
实验结果如表1所示:
表1 淫羊藿等十种中药对性未成熟小鼠子宫系数的影响(±s)
组别 数目(只) 体重(克) 子宫湿重(克) 子宫系数(%) 阴性对照组 11 18.727±2.137 0.022±0.006 0.116±0.027 阳性对照组 11 20.955±2.339 0.119±0.029 0.566±0.116★ 红花组 10 19.300±1.7350 0.021±0.004 0.107±0.022 川牛膝组 11 19.500±0.707 0.023±0.009 0.119±0.043 丹参组 11 19.364±2.181 0.024±0.007 0.126±0.034 女贞子组 10 19.250±1.477 0.020±0.005 0.106±0.026 枸杞组 10 20.650±0.973 0.021±0.005 0.099±0.021 甘草组 9 20.389±1.850 0.019±0.007 0.093±0.026 肉苁蓉组 9 22.111±1.387 0.018±0.00
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