体外放射分析-核医学与核药学教学、学习课件PPT.ppt

第六章 体外放射分析技术 In Vitro Radioassay;定义：以放射性测量基础，在体外实验条件下，对超微 量物质进行定量分析的一类技术的总称。 特点：灵敏度高、准确度高、特异性强、操作简便、稳定 性好、应用范围广。 分类：1、竞争性体外放射分析技术，如：RIA、RRA 等。 2、非竞争性体外放射分析技术，如：IRMA等。 3、由体外放射分析技术派生出来的非放射性标记 免疫分析技术，如：酶标记的免疫分析技术、 化学发光免疫分析技术等。;§.1 放射免疫分析技术;一定量的标记抗原与非标记抗原与有限量的特异抗体发生可逆性的竞争性结合反应，反应平衡后分离出抗原抗体复合物，通过测量放射性复合物量来计算出非标记抗原量。; 放射免疫分析原理示意图 ; 三、放射免疫分析基本试剂与要求;2.标记品（*Ag） ① 高比活性和放化纯度（＞95%）； ② 与标记前的生物活性及免疫活性要一致； ③ 标记的放射性核素T1/2要适宜； ④ 稳定性高。;3. 抗体 ① 高特异性; ② 高滴度; ③ 高亲和力。;四、RIA中B与F的分离技术;五、放射免疫分析的质量控制;l、精密度（Precision） 2、准确度（accuracy） 3、灵敏度（sensitivity） 4、稳定性（Stability） 5、特异性（Specificny） 6、有效性（affectivity）;§.2 免疫放射分析法;双抗夹心法原理示意图;IRMA的标准曲线;二、分离方法 1. 双抗体夹心法 2. 双标记抗体法 3. 标记第三抗体法 4. 生物素-亲和素系统法;项 目;§.3 非放射性体外分析技术;复习题;二、综合题 ;6、放射性活度、照射量、吸收剂量、当量剂量的专名及SI单位是什么？ 7、简述核辐射探测仪器的原理及组成？ 8、简述影响γ放射性测量的主要因素 ？ 几何位置、样品体积、射线的能量、仪器的分辨时间、闪烁体的厚度、本底等。 9、液体闪烁测量的基本原理？ 射线先被闪烁液中的溶剂吸收和传递，直至传给闪烁剂，闪烁剂受激、退激后发出光子被探头接收，经后续辅助电子仪器形成电 脉冲。;10、放射性标记化合物的制备方法？（4种） 11、放射性药物的特点？ ①具有放射性；②不恒定性；③引入量少；④辐射自分解。 12、什么叫放射性核素示踪技术？其基本原理是什么（或放射性核素为什么可作为示踪剂）？其特点有哪些？ ①灵敏度高；②检测方法简单多样；③合乎生理条件；④能定位和定性。 ;13、简述放射免疫分析法的基本原理？ 原理：放射性标记抗原和非标记抗原共同与有限量的特异性抗体发生竞争抑制性反应。当非标记抗原的量逐渐增加时，标记抗原与抗体的结合反应就逐渐减少，呈负相关关系，根据这种函数关系，当知道其中一个变量（放射性大小），就可以求出另外一个变量（待测样品的浓度）。 ;14、RIA和IRMA的区别 反应机制、反应试剂 、分离方法 、待测抗原复合物放射性 、非特异性结合 、其它 15、标准品、标记抗原及特异性抗体在放免分析中的作用和要求有哪些？ 标准品 作用：起定量作用 要求： ①标准品应与待测物质是同一种物质 ②在与结合剂发生反应时，应与待测配 体有相等的活性和亲和能力 ③高度纯化，不能含有任何杂质 ④定量一定要准确。;标记抗原 作用：起测量作用。 要求：①高比活度和高放射化学纯度；②合适的半衰期；③免疫活性一致性；④高稳定性。 特异性抗体 作用：是特异性结合剂，起被竞争结合作用。 要求：高滴度、高亲和力、高特异性。 16、什么叫放射免疫分析的质量控制，质控指标有哪些？ 所谓放射免疫分析的质量控制就是控制误差。其质控指标主要有： 精密度、准确度、灵敏度、特异性、稳定性、有效性、健全性。 ;17什么是RIA准确度 ？简述用质控样品测回收率的方法？ 方法：将质控样品作为待测样品进行测定，经测量全过程，得到测定值。 回收率=测定值/质控样品的浓度×100%。如果回收率在95-105%之间表示准确度高，测定结果可靠。 18什么是非特异性结合率？ NSB是指在没有抗体存在时，Ag*与非特异抗体结合的百分率，是检验标记抗原稳定性的一个参数，一般10%，双抗法5%。 19射防护的目的是什么？剂量限制的三原则是什么？ 目的：防止一切有害的确定性效应的发生，并将随机效应的发生率降到被认为可以接受的水平。 三原则：实践正当化、防护最优化、个人剂量限值化。;20外照射防护的基本方法？ 时间防护、距离防护和屏蔽防