2-糖的分离纯化 糖生物技术课件.pdfVIP

糖的分离和纯化 糖的 分离纯化 多糖的 糖蛋白的 分离纯化 分离纯化 糖链的 分离纯化 一、多糖的提取与分离纯化 1.多糖的分离纯化方法 1.1 杂质的来源 1.2 糖的初步分离纯化 1.3 糖的进一步精制 1.多糖的分离纯化方法 1.1 杂质的来源 水提法 水对植物组织的穿透能力强，提取效 率较高，在生产使用上安全经济。 酸碱提取法： 有些多糖适用于稀酸碱提取，能得到更 天然产物中 高的效率 。 糖的提取 生物酶提取法： 常用的有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶等 超声和微波的辅助提取 ： 利用二者的破碎作用 1.多糖的分离纯化方法 1.2 糖的初步分离纯化 1.2.1 除蛋白 目前，除蛋白的方法很多，按处理方法分有： 物理法 （冻融） 化学法 （三氟三氯乙烷法等） 生物法 （酶法） 复合法 （以上若干几种方法联用） 1.多糖的分离纯化方法 1.2 糖的初步分离纯化 物理法：冻融 原理：通过反复冻融使蛋白质沉淀 具体操作：将粗糖液用去离子水溶解，配成均 匀的5%样品溶液，在－40 ℃冷冻24 小时，室 温缓慢融化，高（8000rpm，4 ℃）离心20 分 钟，除去少量的沉淀。重复数次，至基本无沉 淀为止。 1.多糖的分离纯化方法 1.2 多糖的初步分离纯化 化学法：三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法、 Sevage法 三氟三氯乙烷法：与多糖溶液体积比为1:1，低 温搅拌十分钟，离心得上层水溶液，水层继续使用 以上方法处理几次。此法效率高但沸点低，为 47.6℃，为微毒物质，不宜大量使用。 1.多糖的分离纯化方法 1.2 多糖的初步分离纯化 三氯乙酸法：向多糖溶液中加入三氯乙酸至不再 产生沉淀为止，在5-10℃放置过夜，离心除去蛋白 即可，但可能会引起某些多糖的降解。 Sevage法：氯仿、戊醇/丁醇作为提取溶剂。和 三氟三氯乙烷相比在避免降解上有较好的效果但 要除尽游离的蛋白仍需反复处理。 1.多糖的分离纯化方法 1.2 多糖的初步分离纯化 酶法：以蛋白酶水解蛋白，多和其他方 法联合使用，以提高效率。 1.多糖的分