动物繁殖学课件精液检查.pptVIP

实验四 精液品质常规检查 一、目的和要求 　了解精液品质检查的主要内容，掌握精液品质评定标准和常规检查方法。 二、材料 1.精液：猪的新鲜精液。 2.药械用品：PH试纸、显微镜、显微镜保温箱、载玻片、盖玻片、滴管、100μl微量加样器、5ml移液管、洗瓶、搪瓷量杯、洗耳球、血球计数器、显微镜、吸光纸、滤纸、试管、滴管、血红素吸管等。 3.溶液：精液稀释液、蒸馏水、3%和0.9%氯化钠溶液、75%酒精等。 三、实验内容和方法： （一）肉眼直观检查：精液采得后，立即进行。 1.精液量：精液采得后，用有刻度容器测定精液量。各种家畜射精量为 牛：3～10 ml；羊：0.5～2.0 ml；马：50～200 ml；猪：150～500 ml。 2.色泽和气味：无味或略带腥味。 3.PH值：滴一滴精液于PH试纸上，待颜色改变后与标准色板比较，确定其PH值，牛羊精液略偏酸为6.9左右，马猪精液略偏碱为7.4左右。 4.密度：密度大的精液乳白色有云雾状，密度小精液为灰白色。 5.活力：良好的精液云雾状明显，如牛羊精液。 （二）精液活力和密度的显微镜目测法： 1．活力：精液采得后，立即取一滴精液于载玻片上，置于200～400倍，温度38～40℃恒温的显微镜下观察。 观察到精子活动状态有三种：直线前进、旋转和摆动。评定精子活力的标准是根据呈直线前进运动的精子百分数来确定的，一般评定精子活力按十级制：全部呈直线前进运动为1，90%呈直线前进运动为0.9，80%精子呈直线前进运动为0.8，以此类推。 2．密度测定（目测法）：取样观察方法同活力，评定标准为视野中精子之间的距离而定，一般评定牛、羊的精液精子密度为密、中、稀三级。 密：在视野中精子之间紧挨着，看不到间隙或间隙很小。 中：在视野中精子之间的间隙明显，间距约一个精子。 稀：在视野中精子稀疏，间距超过一个精子。 3.用血球计数器测定精子密度 即每ml精液中的精子总数。 吸取0.1ml精液（已稀释10倍），注入盛有0.9 ml 3%氯化钠溶液的小试管中后作100倍稀释并充分混匀。将混匀的精液滴放在事先准备好的血球计数板及玻片之间的间隙边缘，使精液自行流入计数室，均匀充满，不得有气泡。静置数分钟后，置显微镜下直接观察计数。数室有中方格25个，面积为1平方毫米，计数4个角上的4个和正中1个中方格中的精子数，而后推算1ml精液的精子数。计数时，以精子头部为准。计算公式为： 1 ml精液内精子总数=5个方格的精子数×5（整个计数室25个中方格即0.1mm3的精子数,计数室边长为1mm,高度为0.1mm ）×10（为1mm3精液的精子数）×1000（1000 mm3为1cm3 即1 ml, 为1ml精液内精子数 ）×100（稀释倍数） 将上式简化为：1 ml精液内精子数=5个方格精子数×5 × 106 = 5个方格精子数× 0.05亿(108 ) 。 每样品测上下二个计数室，取其平均值，若二次误差超过55时，则需重测。 作业：  将精液品质评定结果填入下表 实验注意事项： 1.显微镜的灯开到最亮，光圈开到最小，观察效果最好。 2. 滴精液前，先在10×目镜下找到25个中方格，每个中方格中可以看到16个小方格。然后换40×的目镜。计数4个角上的4个和正中1个中方格中（共80个小方格）中的精子数。 3.精液滴放位置如右图。 先放在显微镜上，再加样。 否则，精液会厚薄不一。 * * 计数法 目测法 活力 密度 气味 色泽 采精日期 样品 *