黄芩素对人野生型CFTR氯离子通道的激活作用.pdfVIP

维普资讯 第 34卷 第 3期 吉 林 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．34 NO．3 2008年 5月 JournalofJilinUniversity(MedicineEdition) May 2008 397 [文章编号] 1671—587X(2008)03—0397—04 黄芩素对人野生型 CFTR氯离子通道的激活作用 周 娜 ，侯婷婷。，葛 红。，孙娟娟 ，徐丽娜。 (1．东北师范大学膜通道实验室，吉林 长春 130024；2．辽宁师范大学生物技术与分子药物实验室，辽宁 大连 116029) [摘 要] 目的：研究天然黄酮类化合物黄芩素对囊性纤维化跨膜 电导调节 因子 (CFTR)氯离子通道 的激活 作用 。方法 ：利用稳定共表达人 CFTR与一种对 卤族元素敏感的荧光绿蛋 白突变体 (EYFP—H148Q)的 FRT细 胞模型，测定黄芩素 (o．18、0．55、1．65、5、15、44、133及 400~／mol·L )对CFTR介导的l_内流速度 [d[I一] ／ dt(mmol·L ·S )]的影响。结果：黄芩素对CFTR的亲和力 Ka≈16t~mol·L一，其对 CFTR氯离子通道的激 活作用 10min之 内能达到最大活力的 1／2，并且激活作用能够在其被去除后 20min内就迅速消失 。不 同浓度 (O、2o、5o及 100nmol·L )的Forskolin对黄芩素的激活作用无 明显影响，黄芩素对 CFTR的激活作用能被 CFTR特异性抑制剂 CFTRinh一172抑制。结论：首次发现了黄芩素能够 以剂量依赖方式激活 CFTR，其激活作 用具有迅速 、可逆的特点。并且初步确定了黄芩素通过提高 CFTR磷酸化水平及其直接与 CFTR结合发挥作用。 [关键词] 野生型 CFTR；CI一转运 ；黄芩素 ；激活剂 [中图分类号] Q73 [文献标识码] A Activationeffectofnaturalflavonoidcompoundbaicaleinonhuman wild cysticfibrosistransmembraneconductanceregulatorchloridechannel ZHOUNa，HOU Ting—ting ，GEHong。，SUNJuan—juan ，XU Li—na (1．M embraneChannelResearchLaboratory，NortheastNormalUniversity，Changchun130024，China； 2．BiotechnologyandMolecularMedicineLaboratory，LiaoningNormalUniversity，Dalian116029，China) Abstract：0bjective Tostudyactivationeffectofanaturalcompoundbaicaleinoncysticfibrosistransmembrane conductanceregulator(CFTR)chloridechanne1．Methods A cell—basedfluorescenceassaywasused tOdetermine CFTR—mediateiodideinfluxrate[d[I]／dt(mmol·L ·S一)]activatedbybaicalein(theconcentrationswere 0．18，0．55，1．65，5，15，44， 133and 400t~mol·L一 ) ．Results TheKaofflavonoid baicalein stimulating CFTR wasabout16 “mol ·L ．Thehalfofmaximalactivity wasreached in ten minutesand theactivation disappearedin20minafterbaicaleinwaswashedout． Theactivationofba