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小鼠蓝耳病抗体RRS-Ab酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书
小鼠蓝耳病抗体(RRS-Ab)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相 关液体样本中蓝耳病抗体(RRS-Ab)水平。 实验原理: 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠蓝耳病抗体(RRS-Ab)水平。 用纯化的小鼠蓝耳病抗体(RRS-Ab)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中蓝耳病抗 体(RRS-Ab)结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP 标记的蓝耳病抗体 (RRS-Ab)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。 TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中小鼠蓝耳病抗体(RRS-Ab) 的存在与否。 试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5m ×1瓶 0.5m ×1瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5m ×1瓶 0.5m ×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3m ×1瓶 6m ×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3m ×1瓶 6m ×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3m ×1瓶 6m ×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3m ×1瓶 6m ×1瓶 2-8℃保存 终止液 3m ×1瓶 6m ×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20m ×20倍)×1瓶 (20m ×30倍)×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右 (2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 1 浓度达到100万/m 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分 钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS (PH7.4),用手工或匀浆器 将标本匀浆充分。离心2
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