四个玉米自交系根系内生细菌的分离和鉴定-中国作物学会.PDFVIP

112 作物杂志 Crops 2016（4）：112-117 DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2016.04.018 作物杂志 Crops 2016 年第 4 期 四个玉米自交系根系内生细菌的分离和鉴定 许艳蕊 1 方志军 2 卢晓平 1 穆春华 2 范秋苹 1 郝鲁江 1 1 2 （ 齐鲁工业大学山东省微生物工程重点实验室，250353，山东济南； 山东省农业科学院玉米研究所，250100，山东济南） 摘 要 对 4 个玉米自交系（PH4CV、PH6WC、郑 58 和昌 7-2）根系中的内生细菌进行分离和鉴定，为获得 有益微生物资源奠定基础。通过形态学观察、生理生化特征鉴定及 16S rDNA 基因序列同源性分析和构建系统 发育树等方法对分离菌株进行生物学鉴定，以确定其种属。共分离到 23 株内生细菌，鉴定为 6 个属，包括芽 孢杆菌属（Bacillus sp.）、假单胞菌属（Pseudomonas sp.）、寡养单胞菌属（Stenotrophomonas sp.）、肠杆菌属 （Enterobacter sp.）、贪噬菌属（Variovorax sp.）、鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium sp.），其中优势属为芽孢 杆菌属。4 个玉米自交系内生细菌的种类不同，细菌种类由多到少依次是 PH6WC、郑 58、PH4CV 和昌 7-2。 通过对不同玉米自交系内生细菌的比较分析，发现内生细菌的种类和数量与玉米基因型相关。 关键词 玉米根系；内生细菌；16S rDNA；分离鉴定 植物内生细菌（endophytic bacteria）是指能在 系为研究对象，采用传统培养方法分离内生细菌， 健康植物组织内栖居而对植物不造成实质性危害 结合形态学、生理学特征和 16S rDNA 基因序列同 并与植物建立和谐联合关系的细菌 [1] 。内生细菌已 源性分析和构建系统发育树的方法，对各菌株进行 成为植物微生态系统的天然组成成分，内生细菌的 分类鉴定，为获得有益微生物资源，研究内生细菌 存在可以提高植物对恶劣环境的适应性、强化系统 与玉米品种特性的相关性奠定基础。 的生态平衡和促进寄主植物的生长。近年来，通过 1 材料与方法 对植物内生细菌进行基因改造，增强了内生细菌的 生防潜能和综合防治效果。国外已有许多报道称内 1.1 试验材料 生细菌具有净化环境污染物和生物修复能力；同时 试验材料为玉米杂交种先玉 335、郑单 958 的 内生细菌可作为潜在的生防载体菌加以利用 [2] 。目 亲本 PH4CV、PH6WC、郑 58 和昌 7-2，试验地在 前，已从水稻、玉米、番茄、棉花等多种作物体内 山东省农业科学院玉米研究所龙山试验基地。郑单 获得了内生拮抗细菌，这些内生拮抗细菌对许多植 958 是过去 10 年我国种植面积最大的玉米杂交种， 物病害具有较好的防治效果，它们的合理应用可以 在黄淮海夏玉米区、东北春玉米区等均有种植；先 减少化学农药造成的环境污染，可以提高农田生态 玉 335 的主要种植区域为东北春玉米区，近年在黄 系统的多样性，有利于保持生态平衡 [3] 。植物内生 淮海夏玉米区也有较大面积种植。这两个杂交种均 细菌的种群分布及有益内生细菌是内生细菌的研 具有高产、广适、多抗等特点，以这两个杂交种亲 究热点。 本作为研究对象具有代表性。 我国地缘辽阔，生态环境多样，玉米种质资 亲本自交系 PH6