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两株对辣椒疫霉菌有拮抗作用的拮抗菌分泌蛋白的研究-无机材料学报
15 (2) 81～ 84 中国生物防治 Ch in e se Jou rn a l o f B io log ica l Con t ro l 1999年5月 两株对辣椒疫霉菌有拮抗作用的拮抗菌 分泌蛋白的研究 戴晓燕 关桂兰 ( 中国科学院新疆生物土壤沙漠所, 乌鲁木齐 8300 11) 摘要: 用平板对峙生长法筛选到两株对辣椒疫霉菌具有较强拮抗作用的细菌, 经鉴定为芽孢 杆菌属。测定了无菌滤液的抑菌活性及两菌产生拮抗物的热稳定性。用硫酸铵沉淀法提取到对 辣椒疫霉菌有拮抗作用的抗菌蛋白。发酵条件的研究表明, 用 培养基、 7、培养32 小时, G pH 1、 1 能产生具有较强拮抗作用的拮抗物。 XA XF 关键词: 拮抗细菌; 抗菌蛋白; 辣椒疫霉菌; 芽孢杆菌属 分类号: Q 935. 5; S476. 1 ( ) 辣椒疫霉 P hy top h th ora cap s ici 引起的辣椒疫霉病是我国蔬菜产区分布最广、危害最 重的土传病原真菌之一。目前人们试图用物理和化学农药的方法进行防治, 但尚未见成功报 道。本研究以辣椒疫霉菌为指示菌, 筛选拮抗菌株, 测定抗菌活性及分离抗菌蛋白, 并对影响拮 抗菌分泌抗菌蛋白的外界条件进行了研究。 1 材料和方法 1. 1 供试菌株及培养基 ( ) ( 从新疆4 种药用植物假紫草 A rnebia euch rom a John st. 、雪莲 S aussu rea inv olucra ta . ) ( r itil la r ia w a luj ew i i ) ( p h ed ra equ ise tina ) K ar et K ir 、贝母 F R egel 、麻黄 E B un ge 根际及根 [ 1 ] 内分离到数百株菌株, 采用菌丝生长抑制法 筛选拮抗菌。培养基为芽孢培养基、牛肉膏培养 基、麦芽汁培养基、 培养基。测试用病原真菌及来源见表1。辣椒疫霉菌用燕麦培养基培 PDA 养, 其余均用 PDA 培养基培养。 1. 2 拮抗物的粗提及其抗菌活性、热稳定性的测定 [2 ] [3 ] 采用硫酸铵沉淀法 粗提拮抗物和黄昌华等 方法测定拮抗物的抗菌活性和热稳定性。 1. 3 培养基种类、 值、培养时间、通气量对拮抗菌分泌抗菌物质的影响 pH 选用7种不同成分的液体培养基 、、、 、、、 各100 放入300 三角瓶中, 接种后 A B C D E F G m l m l 28℃振荡培养72 小时, 测其对辣椒疫霉的抗菌活性。选出最佳培养基, 将其配制成 4、 5、 pH pH 6、 7、 8、 9、 10、 11接种后振荡培养48小时, 测 值( nm = 6 10) 及无菌液抑菌 pH pH pH pH pH pH OD 活性。在
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