2005年研究生新生复试试验考试大纲-ibctenda.docVIP

2006免试研究生推荐实验技能考试大纲 生物化学实验 血糖的定量测定---Hagedorn-Juensen定糖法 粗脂肪的提取和定量测定——索氏提取法 氨基酸的分离鉴定---纸层析法 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 蛋白质的定量测定---微量克氏（Kjeldahl）定氮法 蛋白质的浓度测定——Bradford法 核酸的紫外扫描及含量测定 酸性磷酸酯酶酶促反应进程曲线的制作和初速度的测定 酸性磷酸酯酶的酶活力测定 酸性磷酸酯酶米氏常数的测定 参考文献（教材科售） 《生物化学实验讲义》，2005年，谢宁昌等编 未出版 微生物学实验 培养基的配制与灭菌 细菌的简单染色及革兰氏染色 细菌细胞结构的特殊染色 微生物平板计数法 微生物直计及大小测定 微生物的接种及培养技术 四大类微生物的形态观察 诱变育种 玻璃器皿清洗包扎干热灭菌 参考文献（教材科售） 《微生物学实验讲义》，2004年，制药与生命科学学院编 生物化学实验 课程名称：生物化学实验 英文名称：Biochemical experiments 学分：1.5 学时：48 教学对象：生物工程专业、制药工程专业、药剂学专业、食品学专业、生物技术专业 目的：通过对专门的生化仪器设备的使用，熟悉生化提取和分析的原理，掌握简单的生物化学操作，巩固和检验已学的理论知识，为即将开展的毕业论文工作以及毕业后的工作打下基础。 基本要求：了解生化分子的分离鉴定、定性定量分析的原理，熟悉实验操作，掌握有关实验仪器的使用方法。 特点：本实验为完全开放式和自选式实验，整学期全天性开放实验室，在同学们实验条件得到改善的同时，要求也相应提高，实验前同学们必须做好实验的预选工作，必须认真预习实验讲义、观看实验软件，进实验室必带预习报告、实验讲义、工作服，实验报告当次完成并交给指导教师，教师当天批改实验报告并将实验预定表、考勤记录和实验报告成绩发到互联网，以便同学们及时浏览和查寻。 具体实验 实验准备：实验讲解、软件观摩、仪器设备的熟悉与操作、实验规则（2学时） 实验一.粗脂肪的定量测定-索氏提取法（6学时） 实验类型：综合 目的和要求 学习和掌握脂肪提取的原理和测定方法。 熟悉和掌握重量分析的基本操作。 原理 本法为重量法。用脂肪溶剂将脂肪提取后进行称量。该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂，如乙醚或沸点为30℃至60℃的石油醚，借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂溶性物质为脂肪类物质的混合物，其中含有脂肪、游离脂肪酸、磷脂、糖脂、固醇、芳香油、某些色素及有机酸等，称为粗脂肪。 用该法测定样品含油量时，通常采用沸点低于50℃的有机溶剂作为脂肪溶剂。此时，样品中结合状态的脂类(主要是脂蛋白)不能直接提取出来。所以该法又称为游离脂类定量测定的方法。 重点掌握 1.折滤纸斗。2.称样。3.提取。4.回收石油醚。5.称量粗脂重量。6.清洁。7.计算 实验二. 氨基酸的分离鉴定-纸层析法（6学时） 实验类型：综合 目的 通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。 原理 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。 层析溶液由有机溶剂和水组成。 物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值（比移）来表示的: Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 重点掌握 平衡。2.规划。3.点样。4.层析。5.显色。6.计算。7.清洁。 实验三. 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳（4学时） 实验类型：综合 目的 学习醋酸纤维薄膜电泳的操作，了解电泳技术的一般原理。 原理 醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法,醋酸纤维薄膜由二乙酸纤维素制成，它具有均一的泡沫样的结构，厚度仅120微米，有强渗透性，对分子移动无阻力，作为区带电泳的支持物进行蛋白电泳有简便、快速、样品用量少，应用范围广，分离清晰，没有吸附现象等优点。目前已广泛用于血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白，糖蛋白和、同功酶的分离及用在免疫电泳中。 重点掌握 1.浸泡2.点样3．电泳4．染色5．漂洗-微量克氏定氮法（6学时） 实验类型：综合 目的 学习微量克氏定氮法的原理和操作技术。 原理 样品与浓硫酸共热时，分解出氮、二氧化碳和水，氮转变出的氨，进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程通常称之为“消化”。 但是，这个反应进行的比较缓慢，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点，并加入硫酸铜作为催化剂，以促进反应的进行。若以甘氨酸为例，其消化过程可表示如下： CH3NH2COOH + 3H2SO4 → 3CO2 + 3S