级复习动物细胞培养和核移植技术课件.pptVIP

尚辅网 / 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 2、找出关键词并理解它们的含义。 3、叙述动物细胞培养的过程。 细胞贴壁 细胞的接触抑制 原代培养 传代培养 细胞悬液 1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？ 一、动物细胞培养 过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代—50代细胞，部分细胞核型可能改变 原代培养 50代以后的细胞，无限传代 传代培养 细胞株 细胞系 单个细胞 加培养液 细胞接触抑制 胰蛋白酶处理，分瓶培养 10代以内，细胞为二倍体核型 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。 1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？ 2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？ 成块的组织不利于培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。 3.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞。 因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化， 有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。 （三）动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理； 在培养液中添加一定量的抗生素; 定期更换培养液； 2、营养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等 动物血清、血浆 3、温度和pH 温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。 阅读第46页 （四）动物细胞培养技术的应用 1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等； 3、用于检测有毒物质及毒性； 2、动物基因工程离不开动物细胞的培养； 4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。 阅读第46--47页 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 细胞数目增多 一般为植物体 培养结果 快速繁殖、培育脱毒作物等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上： b.细胞水平上： c.个体水平上： 1. 什么是克隆？ 一般指DNA克隆。 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 指基因型完全相同的两个或一个群体。 动物体细胞核移植技术 1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得？为什么？ 目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。 1、说出动物细胞核移植概念、分类。 2、简述体细胞核移植的过程、原理。 （ MⅡ卵母细胞） 减数第二次分裂中期 2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 MⅡ期卵母细胞 (供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛 过程： 整个过程用了哪些技术？ 细胞培养、核移植、胚胎移植 新生牛的性别、基因？ 性别与供体相同、基因与供体的基本相同 繁殖方式？ 无性繁殖 原理？ 动物细胞核的全能性 归纳: 1、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。 不是 （三）体细胞核移植技术的应用前景 阅读P49-50 1、畜牧业方面： 2、医药卫生方面： 可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。 保护濒危物种，增加其存活数量 生产医用蛋白质 组织器官的移植 3、其他领域 了解胚胎发育及衰老过程 更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病 （四）体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率低 2、克隆动物存在健康问题 尚辅网 /