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会计本科财务案例研究形成性考核册答案.doc
免疫学实验总分: 100分实验报告: 20%(原理、方法、结果、结果分析)考勤: 5%考试: 35%实验设计: 40%隔离衣卫生体液免疫功能检测抗体制备和检测未知抗原或抗体的体外检测细胞免疫功能检测PBMC的分离、扩增非特异性免疫功能检测巨噬细胞吞噬功能检测免疫病理超敏反应 概 述实验一 抗体的制备和凝集反应(1)Test 1抗体的制备——初次免疫1. 原理: 异种型抗原: 抗体产生规律:mouseSRBC 抗原 动物 血清(含抗体) 皮下注射,3次2. 方法:脱纤维绵羊红细胞(SRBC)加入3ml 生理盐水,混匀2000rpm, 离心,5min弃上清加入3ml 生理盐水,混匀2000rpm, 离心,5min弃上清制备绵羊红细胞溶液20%、25%、30%、40%取0.1ml 皮下注射免疫小鼠Test 2凝集反应Ⅰ 抗原抗体反应的特征“Lock and Key” 模式: 高度特异性非共价键结合 氢键、静电引力、范德华力、疏水键可逆性结合Ⅱ 影响抗原抗体反应的因素亲和力;亲合力抗原抗体比例抗原抗体比例凝集反应: 颗粒性抗原沉淀反应: 可溶性抗原Ⅱ 影响抗原抗体反应的因素亲和力;亲合力抗原抗体比例抗原的理化性质温度: 37℃~56℃ 温度Ⅱ 影响抗原抗体反应的因素亲和力;亲合力抗原抗体比例抗原的理化性质温度: 37℃~56℃PH值: 6~8离子浓度: 0.9% NaClⅢ 经典抗原抗体反应凝集反应沉淀反应补体结合反应中和反应颗粒性抗原Ⅳ 凝集反应定义: +相应抗体可见的凝集团块 分类:直接凝集反应:玻片凝集 试管凝集间接凝集反应颗粒性抗原相应抗体可溶性抗原+可见的凝集团块直接凝集反应+致敏颗粒 相应抗体可见的凝集团块间接凝集反应ABO血型检测原理:ABO 血型:玻片凝集反应:材料:抗A、B血清玻片 采血针木签 抗A血清or抗B血清?+方法:ABa. 玻片抗A血清抗B血清消毒手指b. 采血 采血针刺破手指滴一滴血至玻片上c. 反应以木签将血清和血滴混匀d. 观察结果预期结果血型ABABO注意事项彻底分离两种血清消毒 木签两侧不可混用及时观察结果将血液污染品放置在特定容器1组:左1;20%2组:左2 ;20%3组:左3 ;20%4组:右1 ;20%5组:右2 ;25%6组:右3 ;25%7组:左1右1 ;25%8组:左1右2 ;25%9组:左1右3; 30%10组:左2右1 ; 30%11组:左2右1 ; 30%12组:左3右1 ; 30%13组:左2右2 ; 40%14组:左2右3 ; 40%15组:左3右2 ; 40%16组:左3右3 ; 40%取0.1ml 皮下注射A. Lock and Key Concept - The combining site of an antibody is located in the Fab portion of the molecule and is constructed from the hypervariable regions of the heavy and light chains. X-Ray crystallography studies of antigens and antibodies interacting shows that the antigenic determinant nestles in a cleft formed by the combining site of the antibody as illustrated in Figure 1. Thus, our concept of Ag-Ab reactions is one of a key (i.e. the Ag) which fits into a lock (i.e. the Ab).B. Non-covalent Bonds - The bonds that hold the Ag in the antibody combining site are all non-covalent in nature. These include hydrogen bonds, electrostatic bonds, Van der Waals forces and hydrophobic bonds. Multiple bonding between the Ag and the Ab ensures that the Ag will be bound tightly to the Ab.C. Reversible - Since Ag-Ab reactions occur via non-covalent bonds, they are by their nature reversible.
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