糖化血红蛋白与糖尿病.docVIP

精品论文 参考文献 糖化血红蛋白与糖尿病 李红 　　河北医科大学第三医院检验科 河北石家庄 050011 　　随着人们生活水平的提高及饮食结构的改变,我国糖病的发病率逐年增加[1]。糖尿病及其急、慢性并发症严重困扰人们健康,及早诊断出糖尿病对预防并发症具有重要意义[2]。糖化血红蛋白(HbA1c)被发现以来，在糖尿病监测中一直有着重要的地位，近年来，随着检测方法的标准化，HbA1c被做为糖尿病诊断标准成为热点。HbA1c作为糖尿病的诊断依据之一，弥补了血糖诊断糖尿病的不足，丰富了诊断方法。本文就糖化血红蛋白与糖尿病诊治方面做一综述。 　　1 、HbA1c的研究及发展 　　1962-1965年Rahbar[3]应用醋酸纤维素膜电泳技术电泳血红蛋白（Hb)，发现许多异常Hb变种。正常人出生后有3种血红蛋白: (1) HbA1占95％以上; (2) HbA2占2.5％～3.0％ 和HbF（胎儿血红蛋白）0.5％～1.0％ 。使用层析法或电泳法分离 HbA，按照迁移顺序其亚组被命名为 HbA0、HbA1a1、HbA1a2、HbA1b、HbA1c，没有连接糖类的血红蛋白迁移到的区域称为非糖化血红蛋白（HbA0），在分子结构上，除HbA0外其余4种Hb分子N-末端？氨酸及alpha;链和beta;链的赖氨酸残疾上都存在能够和葡萄糖等糖类进行生化反应的位点，生成的产物被称为糖化血红蛋白（GHb)；Rahbar于1968年发表题为糖尿病血红蛋白成分的文章。4种含葡萄糖的稳定的糖化血红蛋白中含量最多的是HbA1c，约占80%，是HbA1的主要成分；正常人维持一定的血糖水平，即会形成正常范围内的 HbA1c，当血糖浓度增加时，beta; 链上的糖基化位点数目也增加，HbA1c也就相应增加。研究显示，在120天内，近期血糖对糖化血红蛋白值的影响最大， Tahara 等[4]通过研究证实，HbA1c在血糖控制稳定的患者中，测定前 30天内的血糖水平对当前 HbA1c结果的贡献率为50%，在之前1个月血糖的贡献率为25%，而测定前90-120天的只占10%,故HbA1c是目前国际上公认的用于评估糖尿病患者长期血糖状况的理想指标。 　　2 、 HbA1c检测与影响因素 　　20世纪70年代末第一台检测糖化血红蛋白仪器问世，到现在临床实验室有超过30种不同的方法来分离和定量HbA1c[5-7];可分为两类：一是根据所带电荷不同来分离测量；再就是根据血红蛋白的分子结构不同；常用的检测方法的原理和特点。 　　2.1离子交换层析法 基于电荷差异进行分析 主要是高效液相色谱（HPLC），特异性地分离并检测糖化血红蛋白水平。用树脂为交换物，用不同离子浓度的缓冲液来洗脱，用分光光度分析每个血红蛋白样品中的百分比。方法速度快、精度高。已被世界卫生组织作为HbA1c标准化参考系统的参考方法[8]。 　　2.2亲和层析法 基于糖化与非糖化Hb结构不同 琼脂糖凝胶上用固化的硼酸盐做交换物被用于色谱技术。糖基化的Hb均可以与硼酸盐结合形成可逆的复合物，再用山梨醇分离复合物 并将全部 GHb洗脱出来，此方法测量的是alpha;链和beta;链总糖化血红蛋白，可标准化，以相当于“HbA1c”来报告结果。 　　2.3免疫法 采用单克隆抗体特异识别GHb的抗原表位，利用抗原、抗体反应的原理进行免疫比浊测定。最后计算出HbA1c占总Hb的百分数。 此法可朔源到离子交换HPLC法，精密度不及HPLC法。 　　2.4均相酶法 原理在特异蛋白酶的作用下，酶解消化GHb后显色剂产生显色反应， 通过测定吸光度值求出HbA1c的浓度比值，是近几年推出的成本低、快速、均一的方法。 没有原级标准物质，只能朔源到离子交换HPLC法。该法精密度好 与高效液相色谱法和免疫法有良好的相关性 但其缺点是也不能识别Hb变异体[9] 。 　　2.5电泳法 利用糖化和非糖化血红蛋白在电场中所带电荷不同，通过等电点及泳动速度不同进行分离检测。可分离血红蛋白变异体，但速度慢，精密度不太好，前还没有批量检测能力的商品化仪器，故主要用于糖化血红蛋白研究。 　　2.6即时检验（POCT) 国内使用较多的有两种方法 一是硼酸亲和原理，另一种是免疫反应原理。POCT法具有便携 快速等优点， 可POCT法的精密度尚不能满足临床要求，且对样本中的Hb含量要求有较大限制[10]。 　　2.7影响因素 检测方法不同HbA1c检测结果可不同；HbA1c寿命与红细胞寿命一致，任何改变循环血中红细胞寿命因素都影响HbA1c检测结果，如溶血性与再障性贫血、大量失血和输血、变异血红蛋白、严重肾功能损伤致血红蛋白氨基甲酰化、长期服用大剂量阿司匹林或嗜酒造成血红蛋白乙酰化、严重的肝病、高脂血症、地域、种族、年龄、妊娠等[11]；另对进展迅速的1型糖