神经外科ICU病房鲍曼不动杆菌耐药性基因研究分析.docVIP

精品论文 参考文献 神经外科ICU病房鲍曼不动杆菌耐药性基因研究分析 马英花，杨桂清，曹银光 　　聊城市人民医院，252000 　　【摘 要】目的：调查分析聊城市神经外科ICU病房109株鲍曼不动杆菌耐药性及beta;-内酰胺酶基因型。方法：用K-B法测定临床分离的109株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药性，采用PCR法检测beta;-内酰胺酶耐药基因型。结果：除IMP外，109株鲍曼不动杆菌对其余13种抗菌药物的耐药率均超过50%，PCR扩增对IMP中介或耐药的53株鲍曼不动杆菌有11株扩增到blaOXA-23，产ESBLs组29株中有5株扩增出blasHv、blaCTX-M-14、blaCTX-M-3，2株出现blaSHV、blaCTX-M-1。结论：聊城市神经外科ICU病房鲍曼不动杆菌多重耐药常见，beta;-内酰胺酶产生率高，碳青霉烯酶以blaOXA-23型为主，ESBLs、AmpC酶两种beta;-内酰胺酶基因的多重PCR阳性率均低。 　　【关键词】鲍曼不动杆菌；beta;-内酰胺酶；基因型 　　【中图分类号】R446.5【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-03-049-02 　　不动杆菌是近年来医院感染中分离率增长非常快的菌种，其中鲍曼不动杆菌最为常见[1]。鲍曼不动杆菌是一类不发酵糖类、氧化酶阴性、没有动力的革兰阴性细菌,是目前引起院内感染的重要的条件致病菌,随着广谱抗生素的广泛使用及介入性操作的使用,鲍曼不动杆菌在非发酵菌中分离率仅次于铜绿假单胞菌而位居第二,而在不动杆菌属中分离率最高。该菌在医院环境中分布很广且可以长期存活，极易造成危重患者的感染，因此常从被感染患者的血、体液、脓液及呼吸道分泌物等标本中分离出，在非发酵菌中感染仅次于假单胞菌[2]。本研究对2009年1月-2014年6月，109株鲍曼不动杆菌耐药的表型和常见的beta;-内酰胺酶基因类型进行了检测，现报告如下。 　　1材料与方法 　　1.1菌株来源：2009年1月-2014年6月间共从聊城市人民医院神经外科ICU住院病人送检标本中分离出鲍曼不动杆菌109株，标本类型包括痰液、创面分泌物、血液、导管等，全部菌株均分别使用法国梅里埃VETEC2COMPACT进行细菌鉴定试验。使用的标准菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。 　　1.2药敏试验：采用K-B法测定13种抗菌药物的敏感性。本实验采用的方法和判读标准均按照美国CLSI2014的规定进行。 　　1.3AmpC粗提酶液制备与三维试验：参照文献操作[3] 　　1.4基因检测：均为PCR法:beta;-内酰胺酶基因检测本研究共进行了18种beta;-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶基因检测，引物和产物见表1； 　　表1靶基因PCR引物序列 　　Note：blaADCgene,wholegeneamplificationsequencingfoward primer：5rsquo;-ATGCGATTTAAAAAAATTTCTTGTC/T TA-3rsquo;, re verseprimer：5rsquo;-TTATTTCTTTATTGCATTC-AGCAC AA/GC-3rsquo;.PCR-productis1152bp. 　　2结果 　　我们对聊城市人民医院神经外科ICU病房培养的109株鲍鳗不动杆菌采用K-B法进行了13种抗菌药物敏感性试验，用PCR检测了beta;-内酰胺酶耐药基因型，结果如下： 　　2.1 2009年1月-2014年6月神经外科ICU鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的药敏结果（表2） 　　表2 鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率和敏感率(%) 　　2.2 ESBLs基因的多重PCR结果为：71株鲍曼不动杆菌对CTX/CAZ均耐药，对该71株菌中的每一株均进行了SHV、CTX-M-3和CTX-M-14基因PCR的电泳分析，结果表明，29株菌中共有5株扩增出条带（该29株菌均来自三维试验产ESBLs组），其中3株表现为大小不等的3条单一条带，分别约150bp、300bp、450bp，分别是blaSHV、blaCTX-M-14、blaCTX-M-3；5株扩增条带中的另外2株出现大小一致的双条带，均约为150bp、300bp大小，考虑同时存在blaSHV、blaCTX-M-1两种基因型(图2)。42株鲍曼不动杆菌（该42株菌均来自三维试验不产生ESBLs组）的PCR扩增电泳结果均没有条带出现。 　　3讨论 　　鲍曼不动杆菌感染的治疗一直是临床上很大的难题，因为鲍曼不动杆菌极易对各种消毒剂和抗菌药物产生耐药性，对重症患者、ICU病房的患者等威胁很大。多重耐药鲍曼不动杆菌、泛耐药鲍曼不动杆菌、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌等