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核酸分子 杂交技术 第一节 核酸分子 杂交技术 的基本原理 一、核酸分子杂交的概念 核酸分子杂交是指来源不同 的具有互补序列的两条核酸单 链，在一定条件下，按碱基配对 原则结合成杂化双链的过程。 杂交的双方分别称为探针 （即杂交体系中的已知核酸序列） 和待测核酸，杂交后形成的异源 双链分子称为杂交分子。 探针：是指能与核酸分子中 特定片段互补结合并带有可检测 标记的核酸分子或寡核苷酸片段。 核酸分子杂交过程一般需要 经历了核酸的变性和复性两个阶 段。 变性 复性、杂交 复性、杂交 二、核酸的变性与复性 DNA （一）DNA的变性 DDNNAA denaturation （denaturation） ddeennaattuurraattiioonn 1 1 11、概念 DNA DNA分子在某些理化因素的 DDNNAA 作用下，其两条互补链之间的氢 键发生断裂，双螺旋结构松开分 成两条单链。这一过程，称为 DNA DNA变性。 DDNNAA 2 DNA 2、DNA变性的常用方法 22 DDNNAA 热变性 DNA DNA变性的 DDNNAA 酸碱变性 常用方法 化学试剂变性 1 1 （11）热变性 A A AA260 260 226600 1.5 1.5 11..55 1.4 1.4 11..44 1.3 1.3 11..33 1.2 1.2 11..22 1.1 1.1 11..11 0 0 00 ºC ºC 30 50
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