测定微生物中黄曲霉素含量的一种新的快速萤光法.pdfVIP

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测定微生物中黄曲霉素含量的一种新的快速萤光法

维普资讯 第7卷第3期 上 海 水 产 大 学 学 报 VoI-7,No.3 1998年9月 JOURNAL OF SHANGHAIFISHERIESUNIVERSITY Sep.,1998 q7孕_3 ,J 测定微生物中黄 曲霉素含量 的一种新的快速萤光法 A NEW FAST FLUoRESCENCE M ETHoD To DETERM INE AFLAToXIN CoNTENT IN M ICRoBIALS L/ 卢大用 刘冬玮 张 勤 姚玉英 赵云泉 、 — — — — — 一 \ _ 一 — (上海大学生命科学学院,201800) LU Da—Yong,LIU Dong—W ei,ZHANG Qin,YAO Yu—Ying,ZHAO Yun—Quan (s ofLifeSciE ,ShnnghalUni口iity,201800) 、 关-调 黄曲霉素,黑曲霉,快速 光分析 墩 兰物 KEYW ORDS afiatoxin,aspergiIlusniger,fastfluoremetry 中田分类号 TQ651.2 黄 曲霉素是 由微生物分泌的具有高度致癌 性 的物 质 [CAST 1989,Pestka和 Casale 19903,检测能产生黄曲霉素的食品和粮食 中 黄曲霉紊含量是十分必要的,它是现代食品分 析的重要内容之一。由于黄曲霉素的含量甚微 , 又易于与其它物质混淆 ,因此其测定方法 比静 复杂 。以往常用的测定黄曲霉素的方法是先经 层析后,再测定其光吸收值或荧光值 。本法利 用碱能使黄 曲霉素分解的原理 (图1),无需进 图1 碱处理后黄衄毒幕 B的结构 Fig.1 Thestructureofaf_iatoxin‘B】 行层析分离而测其荧光值 ,这是一种新的快速 afteralkalitreatment 测定方法 。 1 材料与方法 1998—04—08收到 维普资讯 上 海 水 产 大 学 学 报 7卷 1.1 仪器与材料 930型荧光分光光度计,上海分析仪器三厂生产 。黄曲霉索G (aflatoxinG )标准品:购 自 美国Sigma公司。黑曲霉 (aspergiilusn~ger),本院微生物教研室保种 。霉菌培养条件觅卢大用 等[1994]。氢氧化钠和氯仿为分析纯 。 1.2 测定步骤 经高压蒸气灭菌处理的培养液冷却后,接种黑曲霉,37℃培养3天 。将带霉毒素的培养基转 移到15OraL三角烧杯 中。加入约2Oral氯仿 .烧杯置于50C水浴中(不断摇晃),5min后吸取 氯仿层}再加少许氯仿至三角烧杯中,重复上述操作 ,合并氯仿提取液 ,定容至3OraL。该液在激 发波长为36Ohm和发射波长为~50nm下测荧光值,然后加入提取液体积1/5的3

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