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精品论文 参考文献 浅谈微生物快速检验技术及临床应用 黑龙江省第二医院检验科 150001 摘要：随着生物技术的快速发展，为分子生物学基础上的快速检测病原微生物技术提供了基础。基于快速检测病原微生物的新技术被广泛应用于微生物检测，促使疾病诊断的水平有了很大的提高。目前分子生物学技术在临床常见病原微生物快速检测中的应用逐渐增多，对在临床常见病原微生物快速检测中使用分子生物学技术的资料进行回顾性研究分析，对新技术的应用原理、优点进行阐述，有利于推动医疗水平的不断进步。本文结合目前国内外研究的现状，对这四类检测技术进行了阐述。 关键词：微生物；快速；检验技术； 临床；应用 伴随着生命科学的逐渐进步，医学界对于生物体相关知识的认识水平逐渐提升到微观的水平，通过对分子水平的线性结构进行横向的对比，从而反应出同物种不同个体之间存在的差异，为医学以及生物学提供了强有力的技术平台。目前感染性疾病随着新发和突发感染性疾病的涌现，很多已被控制的感染性造成感染的微生物种类日益复杂。因此微生物检验需要充分利用知识，采取现代化的方法，达到快速检验的目的，利用一切手段将数据转化为对医学临床有用的信息。随着近几年大量严重的耐药菌株以及新的病原微生物的出现，严峻的现实临床诊断和治疗带来了极大的困扰，临床微生物实验室尽可能把传统的微生物检验法替代出来，虽然难以实现快速诊断与治疗，但是病原微生物的诊断需要准确、更快速的检出与监测病原体为依据，目前临床微生物检验随着各种生物学技术的发展和相关学科的不断发展，特别是免疫学、病原微生物耐药性检测技术、分子生物学技术、病原微生物的检验对近年来微生物的快速检验技术研究进展现状作了一些探索，现在综述如下。 一免疫学方法在快速检测微生物临床检验中的应用 免疫学技术是利用特异性检测病原微生物，简化了病原微生物的鉴定步骤。该方法应用单克隆抗体结合各种形式的放射免疫分析、酶免疫分析以及荧光免疫分析、化学发光免疫分析、生物发光免疫分析等，足以免去细菌或病毒培养过程和完成微生物感染的快速诊断。这些方法已经被广泛应用于细菌的分型和鉴定，应用酶联免疫技术制造技术有利于推动进一步简化和准确。 二病原微生物耐药性检测技术的应用 1使用NCCLS标准进行抗生素药物敏感试验。准确的药物敏感试验应当遵循NCCLS文件进行，随着人们对抗生素药理学的不断深入认识以及药敏试验方法的不断拓展，对惯用方法的适用范围以及局限性等有了足够的认识。 2耐药性基因检测的应用。 随着用于检测抗菌药物耐药性的基因检测方法以及在临床实验室的广泛应用，耐药性基因检测能准确判断MIC折点，用于细菌耐药性用于快速鉴定慢生长细菌的耐药性，对一些不易培养的微生物耐药性采用探针方法，采用PCR方法对扩增试验和PCR限制性片断长度进行详细分析，自动DNA序列测定技术可以用于氨基糖苷类耐药基因的检测。值得注意的是，检出细菌某种耐药性基因有利于耐药基因的检测。 3对微生物耐药性的长期监测。微生物室的另一项重要任务就是区域性的耐药监测计划，现在很多微生物实验室都已通过计算机分析，我们可以鉴别医院内耐药株的暴发流行和发现一些耐药机制的特征，并可用于临床经验用药，制定适合本于本区域的抗生素使用具有重要意义。 三分子生物学技术在快速检测微生物中的应用 目前的病原微生物的鉴定已不再局限于外部形态结构及生理特性等一般检验上，而是立足于核酸水平的检测上，使人们对微生物的认识逐渐转换为微生物的检测也从生化、免疫方法转向基因水平检测。在众多的检测技术中，核酸杂交和聚合酶链反应已应用于病原菌的快速检测，特别是基因芯片技术给微生物学检测带来新的革命。病原微生物有很多时候出现多重耐药，基因芯片可对临床用药和新药开发具有指导意义，但目前基因芯片技术限制了分子检测技术在临床病原微生物中的应用。 四病原微生物的检验快速检测微生物中的应用 1建立微生物检验分级制度。病原微生物检验的目是过分强调检验结果的准确性，而忽视了标本采集到检验结果的检测，病原学诊断和抗生素敏感试需要更长的时间，而此时病人的检验报告有利于及时地了解病原学检验情况，应建立微生物检验分级报告，并依据确认结果及光学显微镜检查，对细菌、放线菌和真菌选用哪一类抗菌药物有初步指导意义，抗酸染色对一些特殊结构，特殊染色用以观察新型隐球菌及某些细菌的荚膜，暗视野显微镜技术用于直接观察某些病原菌，结合荧光免疫技术可快速鉴定链球菌属和葡萄球菌属，临床标本为微生物实验室检验常规步骤开展。 2提高培养阳性率。病原菌的培养对于感染的治疗效果均有重要意义，