泻心汤配方颗粒和传统汤剂中盐酸小檗碱含量及体外抗菌作用比较分析.docVIP

精品论文 参考文献 泻心汤配方颗粒和传统汤剂中盐酸小檗碱含量及体外抗菌作用比较分析 许士勇 　　山东省平邑县流峪镇卫生院 273309 　　摘要：目的 对泻心汤配方颗粒、传统汤剂当中盐酸小檗碱的含量变化情况进行考察，对比分析泻心汤配方颗粒汤剂与传统汤剂的体外抗菌效果。方法 采用了（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）Diamonsil C18-液相色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液（0.05mol/L），NaH2PO4的磷酸调pH=3，流速为1ml/min，柱温为30℃，检测波长350nm。结果 泻心汤配方颗粒汤剂相比较传统汤剂盐酸小檗碱的平均含量显著增高；配方颗粒汤剂对黑曲霉菌的抑制效果小于传统汤剂且对大肠杆菌的抑制效果好于传统汤剂；两种汤剂均可在一定程度上抑制白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌以及乙型溶血性链球菌。结论 相比较传统汤剂，配方颗粒汤剂含有更高的盐酸小檗碱且能更好地抑制大肠杆菌。 　　关键词：泻心汤；配方颗粒；传统汤剂；盐酸小檗碱；抗菌作用 　　泻心汤源自于张仲景的《金匮要略》中，由黄连、大黄和黄芩三味药材共同组成，因此又被称为三黄泻心汤，具有泄火消痞的功效[1]。随着单味中药精制颗粒在临床上的推广，泻心汤传统汤剂与配方颗粒汤剂当中盐酸小檗碱含量的差异逐渐成为了中医药理论及临床实践中普遍关注的热点问题。本文对不同制法中药复方汤剂对泻心汤有效成分溶出量的影响作出分析，现报道如下。 　　1 实验材料 　　VERTEX STI5000高效液相色谱仪、二元泵、DAD检测器和干燥器。大黄、黄岑与黄连均经贵阳中医学院鉴定。 　　盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110713-200911），乙腈、甲醇色谱纯，娃哈哈纯净水，磷酸二氢钠为分析纯，盐酸为分析纯。 　　2 实验方法和结果 　　2.1 含量测试与方法学分析 　　2.1.1 色谱条件与色谱柱 　　采用（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）Diamonsil C18-液相色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液（0.05mol/L），NaH2PO4的磷酸调pH=3，流速为1ml/min，柱温为30℃，检测波长350nm，进样量为5mu;l。 　　2.1.2 溶液配置 　　2.1.2.1 对照品溶液：精密称取对照品后溶解于甲醇制成备用盐酸小檗碱溶液300mg/L。 　　2.1.2.2 传统汤剂溶液：称取0.2g传统汤剂干燥浸膏放置于100mL容量瓶中并加入1：100的盐酸-甲醇95mL，经密塞、称重、超声处理、放冷、补重、摇匀和滤过后吸取2mL续滤液放置于10mL容量瓶中，经定容、摇匀和滤过后备用。 　　2.1.2.3 颗粒汤剂溶液：精密称取0.2g配方颗粒汤剂干燥浸膏放置于100mL容量瓶中，配置方法同传统汤剂溶液。 　　2.1.2.4 阴性对照溶液：精密称取缺黄连传统汤剂、缺黄连配方颗粒汤剂干燥浸膏分别0.2g置于100mL容量瓶中，配置方法同传统汤剂溶液。 　　2.1.3 方法学分析 　　经双样本齐性方差检验和t检验分析后得出两种汤剂中盐酸小檗碱含量差异显著（P＜0.05），传统汤剂中盐酸小檗碱的含量明显低于配方颗粒汤剂。 　　2.2 抗菌作用 　　2.2.1 实验材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、黑曲霉菌等菌种，培养基为普通营养琼脂、沙氏琼脂培养基、血琼脂平板等，使用生化培养箱与Ⅱ级生物安全柜，实验药物包括泻心汤传统汤剂浸膏干粉与配方颗粒浸膏干粉。 　　2.2.2 溶液配置：在50mL容量瓶中加入适量传统汤剂加开水摇匀后制成浓度0.24g药材/mL传统汤剂溶液；配方颗粒汤剂溶液配置方法同传统汤剂溶液；使用相应培养基对菌株进行24h常规培养而后采取6h液体传代培养并作1：1000稀释。 　　2.2.3 抗菌实验及结果：使用常规琼脂扩散法进行药物的抗菌作用测定，得出泻心汤配方颗粒汤剂对黑曲霉菌的抑制效果小于传统汤剂且对大肠杆菌的抑制效果好于传统汤剂；两种汤剂均可在一定程度上抑制白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌以及乙型溶血性链球菌。 　　3 讨论 　　文献报道使用反相高效液相色谱法对中药复方中的盐酸小檗碱进行测定能够用各种组成的流动相系统[2]，实验表明配方颗粒汤剂中的盐酸小檗碱含量较高，可能由于黄连中的生物碱在反应下生成不溶于水的物质或黄芩、大黄中一些成分抑制了盐酸小檗碱[3]，两种汤剂药效的区别还有待进一步研究与证实。 　　根据实验显示分煎液中盐酸小檗碱的含量显著高于合煎液，建议在所使用的配方颗粒药剂含有黄连药材的情况下严格控制黄连的用药量。 　　参考文献： 　　[1]蒋品，高言明，梁光义，等.三黄泻心汤三种制备方式样品中盐酸小檗碱和黄芩苷含量比较[J].辽宁中医杂志，2012，03：514-516. 　　[2]梁婷，梁光义，高