低强度激光对大鼠.pptVIP

* * * * * * * * * 低强度激光对大鼠力竭运动后骨骼肌自由基、NO代谢的影响 制作者：曹丹丹 研究目的 采用跑台下坡跑模型，研究不同剂量的低强度氦氖激光对大鼠力竭运动后骨骼肌自由基、一氧化氮(NO)代谢的影响，为低强度激光疗法治疗DOMS提供理论依据。 研究对象 成年雌性大鼠72只，体重(202±20)g。 大鼠随机分为5组：1)安静对照组；2)运动对照组3)3个运动加激光处理组(低剂量激光组、中剂量激光组、高剂量激光组)。运动对照组和运动加激光组又进一步分为运动后24 h亚组和运动后48 h亚组，共8个亚组，安静对照组和各亚组的动物均为8只。（附注：大量研究表明，力竭运动后骨骼肌MDA水平会显著增加，其峰值出现在运动后3~24 h，然后逐渐恢复到安静水平。在力竭运动后即刻及运动后24 h，骨骼肌SOD活性可表现为下降或上升） 运动方式 运动对照组和运动加激光处理组的大鼠均进行一次性的力竭离心运动，采用Armstrong等的力竭离心运动模型。动物在跑台上进行下坡跑(-16°，16 m/min)，运动至力竭。运动时使用声、光刺激或用毛刷刺激动物尾部，使动物保持在跑道前1/3处，以保证运动强度。 激光照射方法 运动加激光处理组在力竭运动后以低强度氦氖激光(波长632.8 nm，光斑直径0.5 cm)进行照射。照射前，大鼠用质量分数2%戊巴比妥钠(20 mg/kg)腹腔内注射轻度麻醉，然后固定于鼠类固定台上，剪去局部毛发，在腓肠肌肌腹中点处进行激光照射，光纤与皮肤直接接触，垂直于皮肤。低、中、高剂量激光组的照射功率分别为4、9和14 mW，功率密度分别为20、46和71 mW/cm2，每次照射10 min，对应的剂量分别为12、28和43 J/cm 2 。各剂量运动后24 h亚组在运动后即刻、运动后18 h各照射1次，共照射2次；各剂量组运动后48 h亚组在运动后即刻、运动后18 h、运动后42 h各照射1次，共照射3次。安静对照组和运动对照组均不照射激光。 动物取材和标本制备 各运动后24 h亚组在运动后24 h取材；各运动后48 h亚组在运动后48 h取材。取材前用质量分数2％戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔内注射麻醉，迅速取后肢腓肠肌，在生理盐水中清洗，除去可见的结缔组织，锡纸包好后立即放入液氮中冷冻保存。将腓肠肌取出解冻后，称取0.5 g的肌肉组织，加入生理盐水，于冰冻环境中剪碎并用研磨器研碎，制备成10％匀浆，3 500r/min离心15 min，取上清液进行指标检测 指标检测 肌肉SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法测定；MDA含量采用硫代巴比妥酸法测定；NO含量采用硝酸还原酶法测定，NOS活性采用比色法测定。 测得的肌肉SOD、MDA、NO和NOS数据均以肌肉蛋白含量进行修正，肌肉蛋白含量采用考马斯亮蓝法进行测定。 统计学分析 实验数据均采用SPSS16.0统计软件进行处理，所有数据均以均数±标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析进行各组间的差异显著性检验，显著性水平为P0.05，非常显著性水平为P0.01。 结果与分析 大鼠肌肉SOD（超氧化物歧化酶） 、MDA（丙二醛）活性在力竭运动后的变化。 (见表1)。 运动对照组的肌肉SOD活性在运动后24 h略低于安静对照组水平，而在运动后48 h略高于安静对照组水平，但这些差异均没有统计学显著性意义。在高剂量激光组，肌肉SOD活性明显增加，在运动后24 h，比安静对照组和运动对照组分别高47%和63%，而在运动后48 h，则比安静对照组和运动对照组分别高61%和49%，差异具有非常显著意义(P0.01）低、中剂量激光照射对大鼠力竭运动后肌肉SOD活性变化没有显著影响。 运动对照组的肌肉MDA水平运动后明显升高，在运动后24 h，比安静对照组高23%，差异具有显著意义(P0.05)；在运动后48 h有所恢复，仍略高于安静对照组。在高剂量激光组，肌肉MDA水平在运动后24 h和48 h均明显低于运动对照组，差异具有显著意义(P0.05)(见表1)。低、中剂量激光组肌肉MDA在运动后相对于安静对照组水平的升幅低于运动对照组，但差异没有显著意义。 表1 组别 SOD活性/（U.mg-1） b(MDA)/(nmol.mg-1) 没运动 运动后24 h 运动后48 h 没运动 运动后24 h 运动后48 h 安静对照 36.05±2.99 2.39±0.39 运动对照 32.47±3.10 39.00±6.19 2.94±0.28 2.77±0.68 低剂量 36.92±5.80 37.59±5.30 2.75±0.37 2.