启动子与转录起始.pptVIP

白雪 李晓莲 种工二班 3.3.2 启动子区的识别 启动子的功能既受DNA序列的影响，又受其构象的影响，推测RNA聚合酶并不直接识别碱基本身，而是通过氢键互补的方式加以识别。 （类似于酶与底物的结合） 3.4.4 -10区与-35区的最佳距离 原核生物中，-10区与-35区之间的距离大约是16-19bp，小于15或大于20都会降低启动子活性。 间隔的序列不严格，但是距离的大小可能是决定启动子强度的因素之一。保持适当距离对RNA聚合酶的功能是必要的。 保持启动子这两段序列以及它们之间的距离十分重要，否则就会改变他所控制基因的表达水平 间隔序列对启动子功能相对并不十分重要；但在90%的启动子中，两序列之间的距离约17bp，或者说相隔2个螺旋左右，因而这两个位点大致在DNA双螺旋的同一侧。 不同启动子起动效率不同，分为强启动子（1-2sec启动1次转录）和弱启动子（至少10min才启动1次转录）。 3.4.5 增强子及其功能 * * 3.4.1 启动子区的基本结构 3.4.2 启动子区的识别 3.4.3 RNA聚合酶与启动子区的结合 3.4.4 -10区与-35区的最佳间距 3.4.5 增强子及功能 3.4.6 真核生物启动子对转录的影响 3.4.7 转录的抑制 主要内容： ★启动子：是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性。 ★转录单元：从启动子到终止子的DNA序列 ★转录起始位点：与新生RNA链第一个nt相对应DNA链上的碱基。通常为嘌呤 DNA 启动子 转录起点 -1+1 终止子 编码链 模板链 转录区域 RNA 转录 3.4.1 启动子区的基本结构 启动子区的结构特点 ★Pribnow 实验（ Pribnow box）P76图 -35区 -10区 …..T85T83G81A61C69A52…T89A89T50A65A100 YANT/AYY 真核基因 ★TATA区：Hogness box（类似原核的Pribnow box） - 60 - 40 上游元件 -35区 间隔区 间隔区 转录起始位点 -10区 -30 +1 多种不同的调控元件 5’ 3’ TATAAA TATA区 第一位转录碱基 YANT/AYY 3.4.3 RNA Pol 与启动子区的结合 ??? 1981年Benerji在SV40DNA中发现一个140bp的序列，它能大大提高SV40DNA／兔β—血红蛋白融合基因的表达水平。它位于SV40早期基因的上游，由两个正向重复序列组成，每个长72 bp。目前发现的增强子多半是重复序列，一般长50bp，通常有一个8~12bp组成的“核心”序列，如SV40增强子的核心序列是5’— GGTGTGGAAAG—3’。 增强子或强化子:能强化转录起始的序列。 不是启动子的一部分，但能增强或促进转录的起始，除去这两段序列会大大降低基因的转录水平，保留其中一段或取出插至DNA的任何部位，就能保持基因的正常转录。 增强子很可能通过影响染色质DNA-蛋白质结构或改变超螺旋的密度而改变模板的整体结构，从而使得RNA酶更容易与模板DNA相结合，起始基因的转录。 1）远距离效应； 2）无方向性; 3）顺式调节：只调节位于同一染色体上的基因; 4）无物种和基因的特异性; 5）具有组织特异性; 6）具有相位性：其作用和DNA构象有关; 7）有的增强子可对外部信号产生反应。 ★增强子的特点： 真核生物启动子的结构特点 1）启动子：确保转录精确而有效起始的DNA序列 2）真核生物启动子结构 核心启动子： 保证RNA Pol Ⅱ正常转录所必需的、最少的DNA序列。单独起作用时，只能确定转录起始位点并产生基础水平的转录。 TATA Box（TATA盒）：-30~-25区，类似于原核的-10区。 功能：使转录精确起始。 上游启动子元件或称上游激活序列 CAAT Box（ CAAT区）：一致序列CCAAT,-70附近。 与原核的-35区对应。 GC Box（ GC区）：一致序列GCCACACCC或GGGCGGG，-70附近。 功能：控制转录起始的频率，基本不参与起始位点的确定。 3.4.6 真核生物启动子对转录的影响 原核和真核生物