保卫细胞液泡活体标记方法的比较.PDFVIP

细胞生物学杂志 Chinese l ournal of Cell Biology 2008, 30 : 411 - 414 http ://ww w.cj 保卫细胞液泡活体标记方法的比较 高新起* 任秋萍l 王转斌2 ( LLI 东农业大学生命科学学院， 作物生物学国家重点实验室， 泰安 27101 8; 1 聊城大学农学院，聊城 25 2059; 2 曲阜师范大学生命科学学院， 曲阜273 165) 摘要 液j色的活体标记是研究保卫细胞液泡动态的前提。 结合作者的研究，介绍了利用 丫 吱橙 (acridine orange , AO) 、 Lysotracker Red DND-99、 二乙酸荧光素(fluorescein diacetate , FDA) 、 2 , 7-二(戎 乙基) - 5 (6)- 我基荧光黄(BCECF-AM) 以及绿色荧光蛋白 (green fluores cent protein , GFP ) 志 转基因等活体标记保卫细胞液泡的方法。 研究结果表明， AO可以方便和快捷的标记保卫细胞液泡; 杂 FDA 标记可以显示液j色的边界， 也可以用于保卫细胞液泡的标记。 利用转染GFP 融合基因的方法 也是标记保卫细胞液泡的最好选择。 学 关键词 保卫细胞;液泡;活体标记 物 志 液泡参与植物的多种生理活动过程Il]，也是保卫 生 Ly sotracker Red DND-99(Molecular Probes 公司)、 杂 细胞调节气孔运动的重要的细胞器之一。气孔运动 2 , 7- 二(竣乙基)δ(6) - 援基荧光黄(BCECF-AM， Mo- 胞 过程中保卫细胞的液泡是一个动态的结构，液泡的动 lecular Probes 公司)均用MES缓冲液配制或者稀释到 学 态对气孔的运动是必须的[2 ] 。 液j包动态的研究依赖 细 所需要的浓度。 叶片下表皮用AO、 FDA、 Lysotracker 巳 于液泡的活体标记。 观察液泡的动态多是采用活体物 Red DND-99、 BCECF-AM 染色后， MES 缓冲液冲 标记然后在显微镜下观察。 中性红是较早用于植物 洗。荧光标记的材料均在Zeiss LSM51 0 META 型共 生 液泡标记的试剂，为弱碱性染料， 专一在酸性的细胞 聚焦激光扫