中药制剂分析 第五章、中药制剂中各类化学成分的分析.ppt

二、结构特性和理化性质 （一）结构特性 大多含有C，H，N，O组成 结构复杂，结构类型较多 氮原子有多种形式 有羧基,酚羟基等酸性官能团及酯键取代 (二)理化性质 1. 物理性质 多为结晶型固体，少数为液体 一般生物碱为白色或无色，但结构中具有较长共轭体系，并有助色团的可显不同颜色 旋光性与胜利活性相关，左旋体比右旋体生理活性强 4.呈色反应 三、定性鉴别 （一）一般理化鉴别 沉淀反应是生物碱最常用的鉴别方法。 有些成分也可与试剂生成沉淀而造成假阳性结果。 2．纸色谱法 多为薄层色谱所代替， 利用多缓冲纸色谱来快速鉴别乌头中双酯类生物碱和醇胺类生物碱有其独到之处。 3．高效液相色谱法 在恒定的高效液相色谱条件下，各种生物碱都具有一定的保留时间，可作为定性鉴别的参数。一般要求取得两个色谱系统的保留时间，或应用二级管阵列检测器作出鉴定 酸碱滴定法： a.游离生物碱不溶于水，可先将生物碱溶于过量标准酸溶液中,再用标准碱溶液回滴 b.生物碱盐在水或乙醇介质中，用强酸溶液滴定。一般使其溶于90％乙醇溶液中，可用标准酸乙醇液滴定，用酚酞作指示剂。 重量分析法： （1）将生物碱从中药制剂中提取，用适宜的方法使其生成沉淀，干燥后直接称重 优点: 计算简便，不用换算因数，不必考虑生物碱的分子量。 缺点 挥发性生物碱，蒸发提取溶剂或加热、干燥时能分解破坏以及加碱使生物碱游离时可发生水解的生物碱不可用此法。 取样量大，操作时易乳化，费时。 （2）加入某些试剂，使生物碱生成不溶性沉淀，称量沉淀,计算生物碱的含量。 优点： 取样量少，灵敏度高。 缺点 繁琐，影响因素多，干扰多。 2. 分光光度法： （1）直接测定法 利用生物碱自身的光吸收直接进行比色测定的方法。 一般用于药味较少，干扰不大的中药制剂中生物碱的含量测定。 （2）离子对萃取比色法 原理： 在一定的pH介质中，有机碱与一些酸性染料或磺酸类、酸类的阴离子，定量的结合为有色离子对，此离子对可定量的溶于某些有机溶剂，然后在一定的波长下测定有机溶剂或经碱化后释放的染料的吸收度。 b. 在pH为7的缓冲液中，使生物碱与苦味酸结合成盐，用氯仿提取此盐，然后再以pH为11的碱性缓冲液使氯仿中苦味酸盐解离，并将苦味酸提取到碱性水溶液中再进行比色。 c.直接在pH为4～5的缓冲溶液中，用氯仿提取生物碱苦味酸盐，将氯仿提取液直接进行比色。 硫代氰酸铬铵在丙酮中的克分子吸收系数为106.5(单盐)或213.0(双盐)。故可根据其吸收值A按下式直接测得样品重 W =（ A/ε）×M×V/1000 本方法可不需要标准对照品，但需注意生物碱生成单盐或双盐，并要注意样品的净化。 时，须首先作一工作曲线，目的是考察工作曲线是否为通过原点的直线，以便决定采用外标一点法或外标两点法进行定量，其次需要找出线性范围，以便摸索样品点样量。采用薄层直接扫描定量还需要随行对照品进行，同时要考察稳定性，同板、异板效应和精密度等。 为了克服游离硅醇基的影响 : (1)流动相方面的改进： a.加入硅醇基抑制剂，最常用的硅醇基抑制剂是三乙胺; b.在流动相中加入离子对试剂; c.在流动相中加入季铵盐试剂，例如在水-甲醇流动相中加入0.01mol／L的溴化四甲基胺。 (2)固定相方面的改进： 封尾技术可以使填料的检核更彻底。 键和反应结束后，用三甲基硅氯烷等进行后续处理，尽量减少参与羟基，增加单体覆盖度。 二、结构特征与理化性质 （一）结构特征 基本母核为2—苯基色原酮，现泛指两苯环通过中央三碳链相互联结而成的一类化合物。 （二）理化性质 1.物理性质：多数为结晶性固体 2.溶解度 3.酸碱性：具有酚羟基，显酸性 4.显色反应：与分子中酚羟基及γ-吡喃酮环有关。 5.紫外吸收 一、定性鉴别 定性分析方法主要有 化学显色反应 薄层色谱 (一)化学显色反应 1.还原反应 盐酸-镁粉反应显色反应的机理是黄酮类成分经还原反应后生成花色甙元及其二聚物。 操作： 取样品液5～10mL，加入数滴盐酸，然后加入少许镁粉，如果有黄酮、黄酮醇或其二氢化合物存在，数分钟后则可产生橙色或红色。必要时，需作空白试验。 2．与金属盐类试剂的配合反应 黄酮类成分能与金属离