糖尿病论文：辛伐他汀对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用及对肾脏组织Toll样受体4和MCP-1表达的影响.docVIP

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2017-12-15 发布于河北
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糖尿病论文：辛伐他汀对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用及对肾脏组织Toll样受体4和MCP-1表达的影响.doc

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糖尿病论文：辛伐他汀对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用及对肾脏组织Toll样受体4和MCP-1表达的影响

糖尿病论文：辛伐他汀对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用及对肾脏组织Toll样受体4和MCP-1表达的影响【中文摘要】研究辛伐他汀对1型糖尿病大鼠肾脏组织中Toll样受体（TLR）4和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。探究辛伐他汀在糖尿病肾病中，发挥其肾脏保护作用的可能机理，为临床提供实验依据。方法：Wistar大鼠54只，体重180～220g，由山西医科大学动物实验中心提供，实验大鼠为清洁级。将大鼠随机分为三组：正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、辛伐他汀干预组（S组），每组18只。禁食12小时后，造模组大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）55mg/kg，而NC组大鼠给予柠檬酸-柠檬酸钠溶液55mg/kg。造模72 h后，切断尾静脉采血测血糖，随机血糖连续三次≥16.7mmol/L为造模成功。各组在造模成功后1周给予干预，采取灌胃的方法。S组大鼠以辛伐他汀生理盐水混悬液10mg/kg/d干预，NC组和DM组大鼠每天以等体积的生理盐水干预。每周称体重。各组在干预后的第4周、8周和12周随机选取6只大鼠称重，断尾静脉采血测血糖；麻醉大鼠，腔静脉穿刺采血，分离血清测血胰岛素；代谢笼收集大鼠一天的尿液，测定24h尿白蛋白排泄率。脱臼法处死大鼠，分离肾脏。取少部分肾脏组织液氮速冻后，保存于-70℃，用于实时荧光定量-PCR实验，测定肾脏组织TLR4和MCP-1 mRNA表达量。剩下的肾脏组织以10%中性甲醛固定、梯度酒精脱水、石蜡包埋，制作成石蜡切片。切片经HE染色，在光镜下观察肾脏组织形态学的变化。切片通过免疫组织化学实验测定肾脏组织中TLR4和MCP-1的蛋白表达量。结果：1、三组大鼠血糖及血胰岛素的比较：除NC组外，其余两组大鼠血糖均明显增高，血胰岛素均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。2、三组大鼠24h尿白蛋白排泄率的比较：除NC组外，其余两组大鼠的24h尿白蛋白排泄率均明显增多（P＜0.05）；与DM组相比，用辛伐他汀治疗后的24h尿白蛋白排泄率明显减低（P＜0.05）。3、三组大鼠肾脏组织中TLR4和MCP-1蛋白表达的比较（免疫组化法）：NC组肾脏组织中的TLR4和MCP-1蛋白低表达。同期与NC组相比，DM组和S组两研究因子的蛋白表达量增加（P＜0.05）；与DM组相比，在辛伐他汀治疗后两因子的蛋白表达减少（P＜0.05）。4、12周三组大鼠肾脏组织中TLR4和MCP-1 mRNA表达的比较：与NC组相比，DM组及S组TLR4和MCP-1 mRNA表达增高（P＜0.05）；与DM组相比，辛伐他汀治疗后TLR4和MCP-1 mRNA表达减少（P＜0.05）。5、糖尿病大鼠肾脏组织中TLR4、MCP-1的蛋白表达量与24h尿白蛋白排泄率均表现为正向相关（P＜0.05）。6、肾脏组织形态学观察：NC组大鼠肾小球基底膜均匀一致，且无明显增厚，肾小管及肾间质清晰可见，鲜有炎症细胞。DM组大鼠肾脏形态学改变较明显：肾小球毛细血管腔塌陷、闭塞，肾小球体积增大；系膜区增宽，基膜增厚和系膜基质增多，淋巴细胞数量增多；肾小管上皮细胞肿胀、变性，肾间质可见大量淋巴细胞和单核巨噬细胞浸润。辛伐他汀干预组上述改变明显改善。结论：糖尿病组大鼠肾脏组织中TLR4和MCP-1表达水平显著增高，肾脏组织病理改变明显。辛伐他汀干预组大鼠肾脏组织TLR4和MCP-1表达下降，病理损害减轻。辛伐他汀对1型糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。【英文摘要】：To probe the protective action of simvastatin on kidney and its influence onexpressions of TLR4 and MCP-1 in kidney tissue of type 1 diabetic rats.Methods：54 male Wistar rats, weight 180-220g, were provided by the Animal ExperimentalCenter of Shanxi Medical University. All the rats was clean. The rats were randomly divided intothree groups: normal control group (group NC)、diabetes mellitus group (group DM)、simvastatingroup (group S), and each group had eighteen rats. After fasting for 12 hours, each rat of themodel groups was injected