单增李斯特菌(Listeria monocytogens)鸡卵黄抗体的制备及其抑菌活性研究 Preparation and Characterization of Chicken Egg Yolk Antibodies Against Listeria monocytogens.pdfVIP

单增李斯特菌(Listeriamonocytogens)鸡卵黄抗体的 制备及其抑菌活性研究。 隋建新，林洪，曹立民，王静雪，王光辉 (中国海洋大学食品安全实验室，国东青岛，266003) 攘器 默单域搴斯特箧为摭愿免疫产豢母鸡，比较了不露方法对于鸡卵黄中单增李巅特越抗体(IgY)的分离 效栗，研究确定了所缛王gY秘主要理纯僚震及英砖誓单蹭李靳耱蔼翡薅矜搀蓠效果。礤究绪栗表骥，聚簿硫酸 铵盐析法可以取得较好的提取纯化效果，提取液中的单增李斯特荫抗体效价可以达到1；lO000以上，且蛋白 组分较为单一。lgY具有较好的理化稳定性，pH3～9范匿内均可保持70％以上的免疫港性，经60℃、4h处理 君锈保持爨s7％静免疫活整。露势餮饕实验蔓示，渡态跨募8h、戮态培募24h岳。该撬钵链够舞予肇罐李辩将 菌的黩长产生显筹的抑制率效应；这表明其有望作为新型天然抗茵剂用于生物体及动物憾食品中单增李斯特茵 的预防和控制。 关键诿 单璞事袈耱蓥，蛋黄免疫珐蛋蠡，裁套，瓣蘩活缝 卵黄抗体是禽类摄黄中存在的一种免疫球蛋白 抗生索用于养殖动物的疾病预防控制，或者替代传统 的纯学防滤剂愿挚食瑟的貉腐绦鲜，魑菲常套懿景酶 (eggyolkimmunoglobulins，IgY)，壶母鸡在产蛋的 过程中将免疫球蛋白转移至蛋黄而形成。与常用的 一种新型食品安全控制手段，目前国内外这方面的研 究尚非常有限；而针对单增李斯特菌，尚没有特异性 哺乳动物血清中的免疫球蛋融(immunoglobulin， IgY酶研究报道。在本研究中，我囊制备了单增李蓊 IgG)褪院，lgY在分子量、等电赢、缨胞貘上Fc受俸 结合方式等方面均存在不同之处，而且具有许多显著 特菌的IgY，对不同的提取工艺做了优化比较，确定 的优势：鸡獯产量大，制备方便，IgY的价格相对便 了该IgY的热稳定性和酸碱稳定性，并分别通过固 宜；提取自天然产兹，不存在宰杀动耪蒸导致静动物 体穰滚薅培养试验耪步验诞了该抗体对单增李斯特 菌的生长抑制效应，从而为今后进一步研究IgY对 桶利和伦理问题；IgY的性质相对IgG更加稳定，便 于单增李斯特菌等食品病原菌的抑制机制、开发相关 予保存和应用[1。]。此钋与IgG相比，IgY非常重要 的一个性簏特点在予，不仅具有抗原结合麓力，雨且 酶镦燕物控裁技术和产晶羹定了蓠期王作基础。 对其抗原菌的生长具有显著的抑制作用。尽管其作 1材料与方法 用机制尚不明确，IgY应用于动物病原菌的被动免疫 l。重实验材糕鸯仪器 傺护昶预防控制等都已经有大蛩研究报道静~8】。 单增李斯特菌(Listeria 单增李斯特菌是一种人畜共患的致病菌，也是肉 洋大学生命学院微生物研究室提供，嬲中国海洋大学 制品、奶制ll鑫以及水产食品中最隽重要的病愿菌之 食品安全实验室活纯培养；福氏完全佐裁，福氐不完 一e9’1。]，箕嫩长温度范围较广，在4℃的瞽通冷藏储 全佐荆，辣根酶标记兔抗鸡IgG，Sigma公司；牛胀清 存中仍可以繁殖，动物养殖及鲜活产品储遂过程中往 白蛋(BSA)，j艺京索莱宝公司；优级纯硫酸铵，天津 往难戳有效控制