优良菌种选育(杂交育种).ppt

* * * * * 空气污染 * * * 野生型——原养型 * 图，同核体，异核体，喂养 * * * * * * * * * * * * * ya3 * * * * * 名词解释 野生型 A+B+ A+B+ 营养缺陷型 A+B- A-B+ 原养型 A+B+ 异养型 A+B- A-B+ 原养型分离子 A+B+ 异养型分离子 A+B- A-B+ 亲本分离子 A+B- A-B+ 4.3 杂交育种 细菌 放线菌 霉菌 酵母菌　　　　 ４、酵母菌的杂交育种 通常有球状、卵圆状、柱状或假丝状等多种。 啤酒酵母 《酵母菌的代表属及利用价值》 食品加工 （1）酵母菌属 例：啤酒酵母 （2）裂殖酵母属 （3）假丝酵母属 例：热带假丝酵母 解脂假丝酵母 产朊假丝酵母 （4）球拟酵母属 （5）红酵母属 （6）掷孢酵母属 利用价值： 生产多种药剂 进行石油脱蜡 生产有机酸 处理污水及综合利用 监测重金属 酵母菌的杂交育种 双单特性：存在单倍体和二倍体的生活史, 　　　　　二倍体生活力强，生产能力高，可 　　　　　通过杂交得二倍体来育种。 方法：获单倍体细胞进行杂交。 杂交方式： 孢子与孢子； 孢子与单倍体细胞； 　　　　　　 单倍体细胞间。　 《酵母菌的生活史》 《酵母菌的杂交》 杂交过程包括遗传标记菌株的选择，子囊孢子诱导、接触、接合、接合子形成，直至二倍体细胞出芽为止的一系列过程。 杂交配对的菌株必须是单倍体,所以首先要得到单倍的子囊孢子，常用的孢子培养基为:无水醋酸钠0.8%,氯化钾O.2%,琼脂2%,制成试管斜面。 子囊孢子获得采用蜗牛酶处理,水解子囊壁,然后剧烈振荡,释放出子囊孢子,接着加人液体石蜡,摇匀后孢子就聚集于液体石蜡层。 《实验室子囊孢子的获得方法》 《单倍体接合能力及接合型的鉴定》 将获得的单倍体菌株分别与标准a型、α型菌株混合培养, 与标准a型菌株形成哑铃形接合子的待测菌株为 α型。 标准a型 α型 《杂交》 将 a 型与 α型单倍体菌株混合接种于 YEPD 液体培养基中, 于 30 ℃摇床培养, 观察接合子的形成情况,培养 20 h 后收集菌体, 涂布 YEPD 平板, 挑取较大的单菌落, 鉴定菌株的产孢能力, 能够产孢的菌株为二倍体杂交株, 编号保存。 细菌 放线菌 霉菌 酵母菌 杂交后 筛选优良菌种 微生物优良生产菌种的特征 工业菌种的育种方针 自然突变选育 诱变选育 原理 基本方法 杂交育种 细菌 放线菌 霉菌 酵母菌 原生质体融合 基因工程技术 优良菌种选育——要点 作业 为什么对杂交亲本标记？ 有哪些遗传标记？ 原养型和野生型的区别？ 本科生 Bachelor 博士研究生 Doctor 硕士研究生 Master 老师 ↓ 课题 ↓ 实验 ↓ 结果 ↓ 论文 讲 听 解决方案1 结果1 解决方案2 结果2 * * * * * * * * * * * * * * * * * * 优良菌种选育 杂交育种 微生物优良生产菌种的特征 工业菌种的育种方针 自然突变选育 诱变选育 杂交育种 细菌 放线菌 霉菌 酵母菌 原生质体融合 基因工程技术 优良菌种选育——要点 4.3 杂交育种 杂交(hybridization) 优点: 改变亲株的遗传物质基础,扩大变异范围,使两亲株的优良性状集中于重组体内,获得新品种。 丰富并促进遗传学理论的发展。 　　　　 选择原始亲本 诱变筛选直接亲本 直接亲本之间亲和力鉴定 杂交 筛选重组体 重组体分析 鉴定。 《微生物杂交育种基本程序》 亲本的选择 亲本的标记和 亲和力测定 二倍体形成 重组及 重组体的分离 原始亲本 直接亲本 《微生物杂交育种基本程序》 原始亲本：具有不同遗传背景的优质出发菌株。 直接亲本：具有遗传标记和亲和能力，直接用于杂交配对的菌株。 《杂交过程中亲本的选择》 原养型重组体，MM上生长 《杂交育种的遗传标记》 1、营养缺陷型标记 其中A株为生物素、苯丙氨酸和半胱氨酸缺陷,B株为苏氨酸、亮氨酸和硫胺缺陷型。双亲本都不能在基本培养基上生长,但杂交后代基因重组后产生营养互补的原养型重组体可在基本培养基上生长 2、抗性标记 3、温度敏感性标记 4、其他性状标记 A株 B株 4.3 杂交育种 细菌 放线菌 霉菌 酵母菌　　　　 《细菌杂交方式》 杂交方式 供体与受体细胞关系 参与交换的遗传物质 接合 Conjugation 体细胞间暂时沟通 部分染色体杂合 转化 Transformation 细胞不接触,吸收游离DNA片断 个别或少数基因