猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立-中国动物卫生与流行.PDFVIP

· 10· 中国兽药杂志 2011，45(7)：10～13／罗 飞，等 猪伪狂犬病血清抗体 gB—ELISA检测方法的建立 罗 飞 ，李宇琴 ，陈义平 ，周 洁 (1．中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室，山东青岛 226032；2．扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009； 3．湖南九鼎科技 (集团)有限公司，湖南岳阳 414000) [收稿 日期]2011—04—25 [文献标识码]A [文章编号】1002—1280(2011)07—0010—04 [中图分类号]$852．65 [摘 要] 用纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋 白为抗原，建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的 gB—ELISA方法。最佳反应条件为：抗原包被浓度为3．15Ixg／mL，待检血清稀释度为 1：40。该方 法对猪圆环病毒病、猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪乙型脑炎、猪布 氏杆 菌病5种疾病阳性血清和SPF猪 阴性血清检测呈阴性反应。批间、批 内试验变异系数均不超过 8％。用该方法与HerdChekELISA试剂盒同时对 119份血清进行了平行检测，其相对敏感性、特异 性和符合率分别为：75％、80．7％和79％。试验结果表明：猪伪狂犬病血清抗体 gB—ELISA检测方 法具有较高的敏感性和特异性，且重复性好，可用于猪伪狂犬病毒血清抗体检测。 [关键词] 猪伪狂犬病毒；抗体；gB—ELISA EstablishmentoftheIndirectELISA fortheDetection of ViralGlycoproteinB AntibodiesagainstSwinePseudorabies LU0 Fei ，LIYu—qin ，CHENYi—ping，ZHOU Jie (1．DiagnosticReagentLaboratory，ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter，Qingdao，Shandong266032，China；2．CollegeofVeterinary Medicine，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu225009，China；3．HunanJiudingTechnology(Group)Co．，Ltd，Yueyang，Hunan414000，China) Abstract：ThegB—ELISAwasestablishedbyusingthepurifiedrecombinantproteinasantigenfordetectingPRV antibodies in pig sera． Allreaction conditionsof this gB — ELISA were explored． The optimalcoating concentrationofantigenis3．15 mL，theserum samplewasdilutedto1：40．Theresultsarenegativewhenthe antiseurm againstPCV，PPV，HCV，JEV andPRRSweredetectedbythisgB—ELISA．TheCV betweenand withinbatchesofdetectionwerelessthan8％ ．119pigserasamplesweresimultaneouslydetectedbythisindirect gB—ELISA and HerdChek gB ELISA kit．The relative sensitivity and specificity ofindirectgB — ELISA established inthestudywere75％ and80．7％．Thecoincidenceratebetween thesetwoELISA was79％ ．All resultsshowedthatthisassayhadagoodsensitivity，specificityandrepeatability，itcouldbeusedofrdetectionof PRV antibodyinpigsera． Keywords：s