中国大鲵促甲状腺激素受体的克隆及序列分析-四川动物.PDFVIP

四川动物２０１３年 第３２卷 第３期　　　　　　　　　　　　　　　　　ＳｉｃｈｕａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｏｏｌｏｇｙ　Ｖｏｌ３２　Ｎｏ３　２０１３ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－７０８３．２０１３．０３．００６ 中国大鲵促甲状腺激素受体的克隆及序列分析 王勤，何青，袁月华，徐海龙，李成磊 （四川农业大学生命科学学院，四川雅安６２５０１４） 　　摘要：本实验以大鲵脑组织为材料，通过ＲＴＰＣＲ和ＲＡＣＥ方法成功获得了中国大鲵Ａｎｄｒｉａｓｄａｖｉｄｉａｎｕｓ促甲状 腺激素受体（ＴＳＨＲ）ｃＤＮＡ全长序列。该序列编码５８５个氨基酸，具有典型的Ｇ蛋白偶联受体家族的特点，有４个 Ｎ糖基化位点，７个跨膜 螺旋。同源分析显示，大鲵ＴＳＨＲ与热带爪蟾、变色龙、人的ＴＳＨＲ同源性分别为７０％、 α ７０％和６７％。同时大鲵与其它脊椎动物ＴＳＨＲ在结构上存在一些差异，如缺乏前导序列、胞外部分序列缩短、没有 富含亮氨酸的重复单位（ＬＲＲｓ）等，大鲵ＴＳＨＲ结构上的这些差异是否与其不同的生理功能相关有待进一步研究。 利用邻接法对部分脊椎动物ＴＳＨＲ氨基酸序列构建分子系统树，结果显示有尾目大鲵为两栖动物中较早分化的一 支，表明其进化地位较原始。ＲＴＰＣＲ组织分布分析发现，ＴＳＨＲ基因在大鲵的甲状腺外组织也有表达，其中性腺组 织表达量最高，这可能暗示ＴＳＨＲ与大鲵的生殖调节有关。 关键词：中国大鲵；克隆；甲状腺激素受体；组织分布 中图分类号：Ｑ９５９５；Ｑ７８５；Ｓ９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－７０８３（２０１３）０３－０３４８－０６ ＴｈｅＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＴＳＨＲＧｅｎｅｓｉｎＡｎｄｒｉａｓｄａｖｉｄｉａｎｕｓ ＷＡＮＧＱｉｎ，ＨＥＱｉｎｇ，ＹＵＡＮＹｕｅｈｕａ，ＸＵＨａｉｌｏｎｇ，ＬＩＣｈｅｎｇｌｅｉ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａａｎ，ＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ６２５０１４，Ｃｈｉｎａ） 　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙ，ｗｅｃｌｏｎｅｄｔｈｅｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｙｒｏｉｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＴＳＨＲ）ｆｒｏｍｔｈｅ ｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｇｉａｎｔｓａｌａｍａｎｄｅｒＡｎｄｒｉａｓｄａｖｉｄｉａｎｕｓ．ＴｈｅｃＤＮＡｏｆＴＳＨＲｗａｓ１９２２ｂｐｉｎｌｅｎｇｔｈ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇａｎ ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅｏｆ１７５８ｂｐａｎｄｃｏｄｉｎｇ５８５ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ｗｈｉｃｈｓｈｏｗｅｄ７０％，６７％ａｎｄ７０％ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｔｏＴＳＨＲｏｆＸｅ ｎｏｐｕｓｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ，ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓａｎｄＡｎｏｌｉｓｃａｒｏｌｉｎｅｎｓｉｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅＡｄａｖｉｄｉａｎｕｓＴＳＨＲｈａｓｆｏｕｒｃｏｎｓｅｎｓｕｓｓｉｔｅｓｆｏｒＮ ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎａｎｄｓｅｖｅｎｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎｓ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｏｔｈｅｒｖｅｒｔｅｂｒａｔｅＴＳＨＲ，ＡｄａｖｉｄｉａｎｕｓＴＳＨＲｈａｄ ｓｏｍｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ，ｓｕｃｈａｓｌａｃｋｏｆｇｕｉｄｅｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｌｅｕｃｉｎｅｒｉｃｈｒｅｐｅａｔｓ，ｒｅｌａｔｉｖｅｓｈｏｒｔｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｅｑｕｅｎｃｅ， ｅｔｃ．ＷｈｅｔｈｅｒｔｈｅｓｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｗｅｒｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆＴＳＨＲｉｎＡｄａｖｉｄｉａｎｕｓｓｔｉｌｌｎｅｅｄｓｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙ．Ｉｎ Ｎｅｉｇｈｂｏｒｊｏｉｎｉｎｇ（ＮＪ）ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｏｆ３６ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅＴＳＨＲｐｒｏｔｅｉｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ，Ａｄａｖｉｄｉａｎｕｓｄｅｒｉｖｅｄｆｉｒｓｔｌｙｆｒｏｍａｍ ｐｈｉｂｉａｎ，ｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｒｅｆｌｅｃｔｉｔｓｂａｓａｌｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｓｔａｔｕｓｗｉｔｈｉｎ