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转Bar基因稻米对妊娠小鼠健康影响 　　研究背景 高一时，班里一名同学吃零食后，全身皮肤上出现许多红色小硬块，眼睑肿胀，并伴有哮喘，被同学们紧急送往医院抢救。热心的医生告诉我们，这是食物过敏，与摄取食物中含有异源蛋白有关。在上生物课时，我们也了解到目前世界范围内基因工程方兴未艾，其中Bar基因是使用较多的基因之一。转基因食品已经进入市场和餐厅。这名同学的过敏是不是与吃了转基因食品有关呢？转Bar基因稻米是否会引起食物过敏呢？稻米中Bar基因表达的产物是否会成为过敏原？转Bar基因稻米是否会对人体健康产生影响？心底的疑问激发了我们探究的兴趣。 材料与方法 材料、仪器 ◇小鼠养殖房由2间生物实验室改建而成，1间作为饲养室，1间作为消毒、解剖、器材室。养殖房内配空调通风系统、消毒灭菌系统、照明紫外灯系统、纯净水设备、通讯设备、小鼠养殖笼具等。 ◇稻米：转Bar基因稻谷“香两优681（香125S/Bar68-1）”和常规稻谷“香两优68（香125S/D68）”，分别加工成大米。 ◇基础饲料：为满足蛋白等营养物质的摄入量，选用1993年美国营养学会推出的适用于啮齿动物的AIN-93G饲料配方为参照标准配制而成。 ◇小鼠日粮由稻米、小麦、豆粕、鱼粉、花生油、磷酸氢钙、预混料等组成，每日饲喂2次。 ◇实验动物：SPF级昆明小鼠200只，体重18～24g。 ◇主要仪器：全自动血液分析仪（Sysmex XT-18001）、高速冷冻离心机（TCL-16A）。 ◇主要试剂：slgA、DAO、IgEELISA定量测定试剂盒，孕激素放射免疫试剂盒，PAT ELISA检测试剂盒（型号AP013）。 实验假设、思路、方法 ◇实验假设。转Bar基因稻米中的PAT可能成为肠道中的过敏原：小鼠食用转Bar基因稻米后，由该基因表达的PAT进入其肠道成为异源蛋白，可能成为过敏原。 哺乳动物妊娠的特殊生理：妊娠阶段母鼠摄入致敏物质后，自身及胎儿所受的影响将比普通鼠显著。通过小鼠连续3代、大剂量（饲料中分别含40g或60g转Bar基因大米）饲喂后，预期妊娠15天时小鼠的血常规、生化免疫指标、孕激素含量等可能发生异常。受转基因食物成分的影响，与对照组相比孕鼠的体重和生殖力等可能发生改变。 ◇实验思路见图1。 ◇实验方法包括小鼠喂养、对孕鼠生殖力的影响实验、血样采集、血细胞形态和数量及血生化指标测定、肠黏液slgA检测、血清DAO和IgE检测、血液孕激素含量检测，以及蛋白质的提取和检测等。 实验数据统计与分析 数据用Excel 2003软件包整理，再使用SPSS 17.0软件包进行单因素方差分析、多重比较、T-检验等处理。采用α=0.05为假设检验标准，分析同代小鼠各统计量之间、喂养同种饲料的不同代小鼠之间有无差异。 实验分别针对亲代孕鼠、F1和F2代的孕鼠进行健康分析。分析包括行为学观察、体重变化观察、对生殖力的影响、血细胞形态和数量与血生化指标的组间比较、生化免疫指标比较、血液孕激素含量测定、稻米及小鼠器官中外源蛋白的检测以及消化道外源蛋白残留情况检测。 小结与讨论 喂养转Bar基因稻米的孕鼠行为、体重无明显异常 以不同含量的转Bar基因稻米喂养的3代孕鼠与对照组相比较，妊娠前、妊娠期间、孕鼠分娩后、哺乳期间也未见异常行为的发生。亲代、F1、F2代妊娠小鼠体重增长规律基本一致，各组之间无显著性差异（P0.05）。 喂养转Bar基因稻米对孕鼠的生殖力有一定影响 妊娠、分娩是每一个雌性动物繁殖下一代必须经历的过程。在这个过程中，雌性动物的生殖力，包括妊娠率、活胎率、流产率等将直接反应出一个雌性动物繁衍后代的能力。外界环境的变化、食物成分的变化、动物自身的心理变化等产生的影响都可能引起动物生殖力的改变。本研究中供试的3代孕鼠，总体上表现为转基因组的妊娠率、活胎数高于对照组，流产率低于对照组，这一趋势在亲代“60%转”表现尤为明显，通过检测对应的孕激素水平，结果能印证这一趋势。说明转Bar基因稻米对孕鼠的生殖力有一定影响，尤其是最初接触转基因水稻的亲代。随着多代遗传，小鼠的适应性增强，各项指标逐渐接近对照组。因此我们认为孕鼠的生殖力在一定程度的上升，是小鼠适应新的食物成分的一种生存策略。 喂养转Bar基因稻米后血常规指标的差异性未达显著性水平 本实验对3代妊娠小鼠（P、F1和F2）的红细胞、血小板、白细胞计数及其分类观察，并对血红蛋白等血常规项目进行了逐代检测，结果显示食用转Bar基因稻米的妊娠小鼠血常规8项指标均有不同程度的改变，尤其在亲代表现较为突出，而F2代逐渐接近对照组；但各项指标值均未达统计学显著水平（P0.05）。我们