生理学实验设计方案书报告.docVIP

不同浓度的K+ Ca2+ 对离体蛙心兴奋性的影响 引言：心脏的功能是兴奋与收缩，兴奋以离子为基础，因此细胞外或血浆中的离子浓度的变化，对心脏有重要影响，其中K+ ，Ca2+ 极为重要。根据比较不同浓度 K+ ，Ca2+ 引起离体蛙心发生期前收缩的最低刺激强度，刺激强度大则兴奋性较低。从而得出结论。因此我们设计以下实验，初步研究 K+ ，Ca2+ 对心脏兴奋性的影响，以期加深对心脏正常功能的了解和初步探讨异常功能的形成原理。 一、 研究内容 1、离体蛙心灌流的操作方法 2、不同浓度的K+ ，Ca2+ 对离体蛙心兴奋性的影响 二、材料与方法 1 实验材料 实验动物：蟾蜍 规格：体型大小适中（腓肠肌适于实验）、体重相差±0.1g 选用原因：肌肉易分离、操作简便、体形适中，适于实验 实验试剂：不同浓度的Kcl溶液与Cacl2溶液 标准任氏液 实验器械：BL-420生物机能实验系统，张力换能器，铁支架，双凹夹，试管夹，蛙心套管，蛙心夹，蛙板，蛙类手术器械，滑轮，滴管，小烧杯 ，棉线，刺激器 2 实验步骤及方法 不同K+ ，Ca2+浓度的任氏液的制备 以标准任氏液中K+ 的浓度为“1”，分别配置1/8倍， 1/4倍，1/2倍， 1 倍，2倍， 4 倍，8倍的K+浓度的任氏液（保证标准任氏液中其他离子浓度不变）。 同理，配置同样不同的Ca2+ 浓度的任氏液。 蟾蜍的选取与分组 （1）按实验材料规格取蟾蜍6只，随机分成A， B两组，每组3只，对A组的3只蟾蜍分别标记为A1 A 2 A 3 对B组的3只蟾蜍分别标记为 B1 B2 B3 （2） 将A组的A1 A2设为实验组， A 3 设为对照组； B组的 B1 B2设为实验组 ，B3 设为对照组。 （3）分别对A， B 两组的6只蟾蜍制作离体蛙心标本 离体蛙心标本的制备 （1）暴露蛙心：取蟾蜍一只，毁坏脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏和动脉干。 （2）观察心脏的解剖结构：在腹面可以看到一个心室，其上方有两个心房，心室右上角连着一个动脉干，动脉干根部膨大为动脉圆锥，也称动脉球。动脉向上可分左右两支。用玻璃针从动脉干背部穿过，将心脏翻向头侧，在心脏背面两心房下面，可以看到颜色较紫红的膨大部分，为静脉窦，这是两栖类动物心脏的起搏点，观察静脉窦、心房、心室间收缩的先后关系 （3）心脏插管：先用丝线分别结扎右主动脉、左右肺动脉、前后腔静脉，也可以在心脏下方绕一丝线，将上述血管一起结扎，但此结扎应特别小心，勿损伤静脉窦，以免引起心脏骤停。结扎时，可用蛙心夹在心舒期夹住心尖，将心脏连线提起，看清楚再结扎。准备插管，在左主动脉下穿一丝线，打一松结，用眼科剪在左主动脉上向心剪斜口（一定要剪破动脉内膜），让心脏里的血尽可能流出（以免插管后血液凝固）。用任氏液将流出的血冲洗干净后，把装有任氏液的蛙心插管插入左主动脉，插至主动脉球后稍退出，再将插管沿主动脉球后壁向心室中央方向插入，经主动脉瓣插入心室腔内。此时可见插管内液面随心搏上下移动。将预先打好的松结扎紧，并将线固定在插管壁上的玻璃小钩上防止滑脱，用滴管吸去插管内液体，更换新鲜的任氏液，小心提起插管和心脏，在上述血管结扎处的下方剪去血管和所有的牵连组织，将心脏离体。此时，离体蛙心已制备成功，可供实验 K+浓度不同的任氏液 1/8 1/4 1/2 1 2 4 8 A1(mv) A2(mv) A3(mv) 根据图表绘制不同浓度的K+与引起期前收缩的最低刺激强度曲线，观察结果，并作出结论。 不同浓度的Ca2+对离体蛙心兴奋性的影响 取制备好的离体蛙心套管B1 固定在铁支架上，并按照连接标本及实验装置中所叙述的方法进行连接，得到正常的离体蛙心收缩曲线，观察分析。 吸出插管内的全部灌流液，换入配置好备用的1/8 Ca2+浓度的任氏液，待曲线稳定后，用电极刺激离体蛙心，找到引起期前收缩的最低刺激强度，并记录。 按照在不同浓度的K+对离体蛙心兴奋性的影响中的操作方法进行实验，得出结果，并绘制表格。 Ca2+浓度不同的任氏液 1/8 1/4 1/2 1 2 4 8 B1(mv) B2(mv) B3(mv) （4） 根据做出的表格绘制不同浓度的Ca2+ 与引起离体蛙心期前收缩的最低刺激强度曲线，观察结果并得出结论。