人高考生物二轮专题复习：植物细胞工程和动物细胞工程.pptVIP

实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理：B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验材料：小白鼠 实验器材：培养皿、针筒等等。 实验过程：如下页 * 二 、动物细胞工程 (第二课时) 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植 五、动物细胞培养 从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞 。 1、动物细胞培养概念： 动物胚胎或 幼龄动物的组织、器官 如：肾、肺等 细胞生命力旺盛，分裂能力强 原理：细胞增殖 使细胞和培养液充分接触 组织 单个细胞 生长和增殖 2、过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代 培养 1-10代细胞 40—50代细胞(细胞株) 传代培养 无限传代（细胞系） 用 处理 胰蛋白酶 遗传物质不变 遗传物质改变， 能无限增殖（癌变） 3、条件： 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 补充合成培养基中缺乏的物质 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 O2作用：进行 呼吸，提供能量 CO2作用：维持培养液的PH值 （95%空气和5% CO2 ） （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。） 有氧 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 4、应用 读下面一段文字资料，思考以下问题： 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念 2、怎样才能获得单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。 根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案: 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 （1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合? （小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖， B淋巴细胞能够产生抗体， 细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。 （2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗? 有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞， 具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞， 所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。 （3）整个制备过程为何要经过两次筛选? （第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 胚胎移植技术 试管动物（婴儿）培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 新个体 母体子宫内 孕育、产出 *