杉木第四号染色体特异性rapd片段的获得-广西植物.pdfVIP

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 24(5)：418—421 2004年 9月 杉木第四号染色体特异性 RAPD片段的获得 李湘阳1，2，周 坚1 (1．南京林业大学森林资源与环境学院，江苏南京 210037；2．中国林科院热带林业研究所，广东广州 510520) 摘 要：分别分离杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb．)Hook)同一细胞中的第四号具随体染色体及剩余 2O条非随体染色体，进行DOP—PCR扩增，分别以随体染色体及非随体染色体的DOP—PCR产物为模板，用成 对随机引物进行RAPD分析。用弓I物对OPB07+OPB10进行扩增，在 500~250bp之间，随体染色体有4条 特异扩增带；用引物对 OPB07+OPB18在 900bp左右获得 1条随体染色体特异带；用引物对 OPD07+ OPDO5在 250bp左右得到随体染色体 1条特异扩增带。 关键词：杉木；染色体；DOP-PCR；RAPD 中图分类号：Q943 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2004)05—0418—04 RAPD specialfragments0fsatellitechromosomes [^rom c^unnm●2，■zam t●a l-a ceol-ata LIXiang—yang，ZHOUJian (1．CollegeofForestResouresandEnvironmentNanjingForestryUniversity，Naniing210037，China； 2．TheResearchInstituteofTropicalForestry。Guangzhou510520，China) Abstract：A pairofsatellitechromosomesand20othernon—satellitechromosomesinonecellfrom Cunning— hamialanceolatawereisolated．ThetwokindsofchromosomeswereamplifiedbyDOP—PCR．AndtheDOP— PCR productswereanalyzedbyRAPD-PCRusingpairwisecombinationsofprimers．Therewerefourspecific fragmentsbetween500—、250 bpwhichbelongtosatellitechromosomesin theRAPD profilewithpairwise primersOPB07andOPBIO．Anotherspecificabout900bpfragmentofsatellitechromosomeswasobtainedin theamplifiedproductswithpairwiseprimersOPB07andOPB18．Andaspecificabout250bpfragmentalso belongedtosatellitechromosomes，which wasgetin theRAPD profileusingpairwiseprimersOPD07and 0PDO5． Keywords：Cunninghamialanceolata；Chromosome；D0P—PCR；RAPD 染色体微分离、微切割及微克隆技术 自1981年 染色体的进化等方面 (郭歌等，1998)。马有志等 Scalenghe等创立至今 已经在人和动物的基因组研 (1999)应用氩离子激光分离普通小麦的1B染色体 究中发挥了巨大的作用。该技术在二十世纪9O年 及体细胞 ，证明以分离的细胞核为模板进行 RAPD 代初应用于植物材料 的研究 (Sandery等，1991)。 研究与常规 RAPD反应 (用从幼叶提取的基 因组总 目前国内植物材料的染色体微分离、微切割及微克