神经系统安全性评价3 - 副本.pptxVIP

药物的神经系统安全性评价;第一节：概述第二节：药物神经系统安全性评价的内容第三节：药物安全性评价的意义;一、概述 近年新药研发领域，大量药物由于神经系不良反应而退出市场，甚至有药物由于神经系统不良反应不能进入临床试验，从而造成人力资源的巨大浪费，人为地拉长了新药研发的周期，给患者造成了严重的身心危害。;药物的神经系统不良反应包括：1.药物致脑炎样反应：人用狂犬病疫苗、麻疹毒活疫苗、咪唑类驱虫药等。2.药物致脑血管损害：三环类抗抑郁药、肾上腺皮质激素、雄激素等，均可致血压升高，造成脑出血。3.药物致颅内压增高：皮质激素类、氨节西林、氟喹诺酮类等。4.药物致中毒性脑病：头孢菌素类、抗结核药、苯妥英钠、丙戊酸钠、卡马西平等。;5.药物致锥体外系反应：吩噻嗪类三氟拉嗪、三氟丙嗪、甲哌氯丙嗪、氟奋乃静和奋乃静、氯丙嗪；某些钙离子拮抗剂:盐酸氟桂嗪以及甲氧氯普胺等。6.药物致周围神经损害：抗结核药物、氨基糖苷类、利尿剂等。7.药物致神经—肌肉阻滞型病变：肾上腺皮质激素类、氨基糖苷类抗生素、氯喹、苯妥英钠等。8.药物致中枢神经系统的其它不良反应：甲硝唑、万古霉素、洋地黄、喹诺酮类抗生素等。;神经系统安全性在体研究;(一)动物:SPF级动物昆明种小鼠共207只，符合纳入标准200只。200只小鼠雌雄各半，体重18-22g，饲养于国家成都中药安全性评价中心普通动物房，实验前动物适应环境。选择健康(雌性须未孕)动物作为受试动物，雄性、雌性动物分开饲养，每笼饲养5只，饲养条件符合国标GB 14925-2001，室温21士5℃ ，相对湿度55士15%, 12小时明暗交替。动物以鼠饲料喂养，去离子水自由饮用。;(二)仪器 1.小鼠自主活动测试仪:仪器型号为JXDH-I，由河北冀星试验仪器公司提供。活动仪中装有定位的红外线光束，小鼠在有机玻璃格中活动可切断光束，活动仪则自动记录小鼠切断光线的次数，即记录自发活动数。 2.小鼠甩尾仪:由Biological Reseach Apparatus ( Italy)公司提供。有辐射热加热点，可记录小鼠逃避热反射的时间。 3.转杆仪:XZC-4B转棒式疲劳仪。调整传送带位置，按动转动按钮，转棒转动，调整疲劳仪的转速为巧转/分。提小鼠尾将小鼠放到转棒上按下清零按钮，清零后开始记时，当小鼠跌落下来后压动下踏板，记时器被锁住，显示时间为小鼠在转棒上停留的时间。 4.Morris水迷宫:北京天坛公司制造，由平台、不锈钢圆形水槽、不锈钢支架，摄像机支架、摄像机及广角镜头、图像采集卡和软件等部分组成。 5.其他:电子天平、秒表、Iml注射器、小鼠固定器等。;(三)实验分组:根据《化学药物一般药理学研究技术指导原则》，对神经系统应“定性和定量评价给药后动物的运动功能、行为改变、协调功能、感觉/运动反射和体温等的变化”。小鼠共计207只，符合纳入标准200只。200只小鼠分为四大组。 第一大组观测甩尾潜伏期 第二大组观测自发活动计数 第三大组观测小鼠转杆疲劳仪落下个数 第四大组观测逃避潜伏期 每一大组各用5O只(体温的测定在Beagle犬中进行)，雌雄各25只，随机再分为5小组，即HX0507高、中、低3个剂量组、DIPRIVAN对照组及溶剂(生理盐水)对照组，每小组10只动物。; ;对小鼠脑组织脂质过氧化作用的影响：; 对小鼠脑组织神经递质的影响： 脑组织乙酰胆碱，NO，Glu含量的测定;对小鼠脑组织能量代谢的影响： 脑组织SDH活性，ATPase活性的测定;实验动物与分组;主要试剂与仪器;结果;甲醛对小鼠脑组织神经递质的影响;甲醛对小鼠脑组织能量代谢的影响;以吗啡为例讨论药物对神经系统的不良反应;丘脑内侧与疼痛整合、感受有关 边缘系统及蓝斑核与情绪、精神有关 延髓孤束核阿片受体与呼吸、咳嗽有关 脑干极后区阿片受体与胃肠道有关 ;水通道AQP4参与吗啡依赖的机制研究 ; AQP4基因敲除能够抑制吗啡慢性处理所致的GLT-1表达下调、谷氨酸重摄取能力的降低及突触间隙谷氨酸水平的改变，并且给予GLT-1特异性抑制剂二氢卡因酸盐（Dihydrokainate ，DHK）能够增加AQP4基因敲除小鼠吗啡躯体依赖的形成。但AQP4与GLT-1之间是否有直接关系仍然不清楚。;大鼠采用递增给药的方式，从第1天至第5天皮下注射吗啡，剂量分别10、20、30、40、50 mg/kg，每天两次（8:00和17:00），建立慢性吗啡躯体依赖模型。用戒断症状评分以判断模型建立是否成功。 症状：死狗样摇体、齿抓、咀嚼、纵涎、流泪、毛发直立、眼睑下垂、腹泻等戒断症状进行评分 ;通过实时定量PCR(Real-time PCR) Western blot方法，从m RNA水平和蛋白水平检测AQP4