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— 30— 江苏农业科学 2016年第44卷第6期 韩 蕾,李俊林,苏彦华.拟南芥突变体kea的表型分析及对生长素的响应特征[J].江苏农业科学,2016,44(6):30-33. doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2016.06.007 拟南芥突变体kea的表型分析及对生长素的响应特征 1,2 1,3 1 韩 蕾 ,李俊林 ,苏彦华 (1.土壤与农业可持续发展国家重点实验室/中国科学院南京土壤研究所,江苏南京210008; 2.中国科学院大学,北京 100049;3.南京林业大学,江苏南京210037) 摘要:对拟南芥kea突变体表型分析的结果表明,在黑暗条件下,单个KEA缺失后下胚轴和主根伸长与野生型相 比没有明显差异,而多个KEA缺失导致幼苗出现去黄化现象,表现为下胚轴伸长受到抑制,子叶完全打开,真叶开始 出现,主根发育良好。qRT-PCT结果表明,呈现去黄化现象的kea多突变体内生长素合成基因IAA1、IAA3、IAA17的表 达下调,而生长素转运基因AUX1、PIN1、PIN3、PIN7的表达没有明显变化。外源施加生长素类似物NAA能够恢复kea 多突变体去黄化现象。上述结果暗示KEA在调控拟南芥光调控发育的某些方面发挥重要作用。 关键词:拟南芥;去黄化;生长素;暗形态建成 中图分类号:Q945.12 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2016)06-0030-03 植物在光照下和黑暗中表现为不同的生长特性;光照下 1.1.1 植物材料 拟南芥野生型 Col-0,单突变体 kea3、 萌发的幼苗表现为:下胚轴伸长受抑制、主根伸长、子叶展开、 kea4、kea5、kea6;双突变体kea4/5和kea4/6,多突变体体kea4/ 叶绿素累积,称为光形态建成(photomorphogenesis)。在黑暗 5/6。其中kea3、kea4、kea5、kea6单突变体种子从ABRC拟南芥 中,植物的生长呈现出多种黄化特征,称为暗形态建成(skoto 种子资源库购得。双突变体和多突变体通过杂交方法得来。 [1] morphogenesis) 。黄化苗主要特点为迅速生长和伸长的下 1.1.2 生长条件和培养基 光照培养箱(MMM,Germany)的 胚轴、发育迟缓的主根、闭合的子叶形成顶端弯钩(apical 培养条件为:温度23℃,相对湿度70%,连续黑暗培养。培 [2] [11] hook) 。在自然界中,种子发芽起始于暗形态建成过程:种 养基修改自Pilot等的配方 ,成分包括:1mmol/LCaSO, 4 子萌发后,大部分营养资源流向下胚轴,用于下胚轴伸长而不 2mmol/LNHNO,1mmol/LKHPO,1mmol/LMgSO, 4 3 2 4 4 是子叶和根系的发育,这种快速伸长的方式为幼苗更早的接 50 mol/LNaFe-EDTA,50 mol/LHBO,12 mol/L μ μ 3 3 μ 收光照提供了物理支持。此外,子叶通过紧闭形成顶端弯钩 MnCl,1 mol/L CuCl,1 mol/L ZnCl,30 nmol/L 2 μ
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