猪主要繁殖障碍疾病病原的多重实时定量犘犆犚快速检测-畜牧兽医学报.pdfVIP

畜牧兽医学报 ， （ ）： １９９８２００２ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 猪主要繁殖障碍疾病病原的多重实时 定量犘犆犚快速检测 赵绪永，赵 丽，宁豫昌，马 辉 　 　 （郑州牧业工程高等专科学校，郑州 ４５００１１） 摘 要：本研究旨在建立多重 方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ ）、猪圆环病毒 型 ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ ＰＲＲＳＶ ２ 　 （ ）、猪伪狂犬病毒（ ）和猪细小病毒（ ）。根据 数据库中 、 、 、和 的核 ＰＣＶ２ ＰＲＶ ＰＰＶ ＧｅｎＢａｎｋ ＰＲＲＳＶ ＰＣＶ２ＰＲＶ ＰＰＶ 苷酸序列设计特异性引物和探针，通过优化反应条件，检测系列稀释的纯化阳性质粒，建立检测 、 、 ＰＲＲＳＶ ＰＣＶ２ 和 的单项和多重 方法。灵敏度和特异性试验结果表明，无论是单项和多重 ＰＲＶ ＰＰＶ ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ Ｒｅａｌｔｉｍｅ 检测，该方法都具有高度特异性，与其它病原检测无明显交叉反应；对 种病毒的最低检测量为 １拷贝或 ＰＣＲ ４ ＜１０ ，检测灵敏度比常规 高 倍。对 份临床样本进行检测，多重 检测结果和单项 １ＴＣＩＤ５０ ＰＣＲ １００ ４０ ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ 检测结果完全一致。建立的同时检测 、 、 和 的多重 方法具有 ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ ＰＲＲＳＶ ＰＣＶ２ＰＲＶ ＰＰＶ ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ 快速、灵敏、特异、重复性好和能对样品进行定量检测等优点。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；猪圆环病毒 型；猪伪狂犬病毒；猪细小病毒；多重实时定量 ２ ＰＣＲ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．２８５．３ Ａ ０３６６６９６４２０１２１２１９９８０５ 　　　　 　　　　 犛犻犿狌犾狋犪狀犲狅狌狊犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犕犪狅狉犘犪狋犺狅犲狀狊狅犳犚犲狉狅犱狌犮狋犻狏犲犉犪犻犾狌狉犲犇犻狊犲犪狊犲狊犻狀 犼 犵 狆 犛狑犻狀犲犫 犪犕狌犾狋犻犾犲狓犚犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚 狔 狆 ， ， ，