极端嗜盐古生菌启动子序列缺失突变的微量热研究microcalorimetric.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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极端嗜盐古生菌启动子序列缺失突变的微量热研究microcalorimetric.pdf

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2006 年第64 卷化学学报 Vol. 64, 2006 第6 期, 508～514 ACTA CHIMICA SINICA No. 6, 508～514 ·研究论文· 极端嗜盐古生菌启动子序列缺失突变的微量热研究朱建裕a,b 刘义c 胡岳华b 曾驰a 张立侠c 崔长征a 黄玉屏a 沈萍*,a a ( 武汉大学生命科学学院武汉 430072) (b 中南大学资源加工与生物工程学院长沙 410083) c ( 武汉大学化学与分子科学学院武汉 430072) 摘要用微量热方法和DNA 缺失突变技术研究了来源于极端嗜盐古生菌 R1 上的一个推测的启动子片段(RM10)在大肠杆菌中的启动子功能. 启动子片段融合到质粒pKK232-8 上无启动子的氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因前来检测它驱动基因表达的能力, 缺失分析 RM10 启动子片段定位具有启动活性的重要功能区. 实验结果从热动力学角度揭示, 这个启动子片段上含有－35 区和－10 区特征的1382～1517 bp(碱基对)区段是它在大肠杆菌中具有启动子功能的关键部分; 在1～1382 bp 区段或1571～1848 bp 区段上还存在它的负调控区. 该研究为基因启动子功能研究提供了一种新的、更加灵敏便捷的、化学与生物学相结合的方法. 关键词微量热; 嗜盐古菌; 缺失突变; 启动子 Microcalorimetric Study on Deletion Mutagenesis of the Gene Promoter Sequences from the Extremely Halophilic Archaea ZHU, Jian-Yua,b LIU, Yic HU, Yue-Huab ZENG, Chia ZHANG, Li-Xiac CUI, Chang-Zhena HUANG, Yu-Pinga SHEN, Ping*,a (a College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072) (b School of Resource Processing and Biological Engineering, China Southern University, Changsha 410083) (c College of Chemistry and Molecular Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072) Abstract Microcalorimetric method and DNA deletion mutagenesis technique were combined to study a putative gene promoter fragment (RM10) from the extremely halophilic archaea, Halobacteri