桑属植物ITS序列研究与系统发育分析.pdfVIP

； （） 蚕 业 科 学 11 2004 30 1 CANYE KEXUE 桑属植物ITS 序列研究与系统发育分析 赵卫国 潘一乐 张志芳 （中国农业科学院蚕业研究所，农业部家蚕生物技术重点开放实验室，镇江 212018） 摘 要 用 产物直接测序法对桑属的 个种 个变种共 份桑种质和构属构树的 序列进行了测定。结果 PCR 9 3 13 ITS 表明：桑属植物 长度平均约为 ；桑属 为 ； 长度平均为 ；桑属植物 序列 ITS1 189 bp 5 .8S rRNA 152 bp ITS2 212 bp ITS G + C 含量为 左右。用 软件构建了桑属植物 序列的系统发育树，并探讨了参试桑种质的亲缘关系。 60% DNASTAR ITS 关键词 桑 内转录间隔区（ ）序列 系统发育 ITS 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） S888 .2 A 0257 - 4799 2004 01 - 0011 - 04 我国桑树遗传资源丰富，大约有3 000份种质资 1.2 叶片总DNA 的提取 ［］ 5 源，包括 个种 个变种，不少桑种为我国特有，且 采用CTAB 法 提取桑树基因组DNA 。 15 4 分布范围广泛。开展桑属植物系统发育和分子进化 1.3 ITS 序列的扩增、纯化和测序 扩增反应在 公司的 型 扩增仪 研究，对丰富的桑树遗传资源收集、整理、保存和创 PCR PE 9600 PCR 新利用有着重大意义。 上进行，反应体系为50 L，内含：双链DNA 模板（约 ! ）， （ ）， （ ），正反 内转录间隔区（ ， ）位 25 ng MgCI2 2 .5 mmOI/ L dNTP 200 mOI/ L internaI transcribed spacer ITS ! 引物 （ ， 于18S 和26S rRNA 基因之间，被5 . 8S rRNA 基因分 5C-CGTAACAAGGTTTCCGTAGG-3C 5C-TCCTC-