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新型重组纤维蛋白原受体拮抗剂的表达-中国药科大学学报！
学报
Journal of China Pharmaceutical University 2005, 36(2):173-178 173
、
姚 佳, 杨 坤, 杨建波, 华子春, 杨 洁
(, 210093)
【 】 :构建两 个预期能够成为纤维蛋白原受体拮抗剂的重组融合蛋白。 :人工合成北美水
蛭 Decorsin 的基因序列, 利用基因工程的方法构建两 个重组蛋白, 分别是AnnV-D39:Annexin V 加上Decorsin 全
序列和AnnV-D27:Annexin V 加上Decorsin 的羧基端27 个氨基酸序列。在AnnV-D39 的Annexin V 和Decorsin 序列
之间加入了由10 个氨基酸组成的连接肽GGGGSGGGGS。利用质粒pET-28(a+)作为载体, 将上述融合蛋白在大
肠杆菌E.coli BL21(DE3)中以包涵体的形式进行高效表达, 纯化后, 进行抗血小板聚集活性测试。 :基因表
达的产物在变性条件下用DEAE-Cellulose52 和SepharoseCL- B 层析纯化。 随后进行的血小板聚集分析表明, An-
nV-D39 具有良好的抗血小板凝集活性, 而 AnnV-D27 没有显示相似活性。 :AnnV-D39 作为一种新的纤维蛋
白原受体抑制剂显示了良好的活性, 而Annv-D27 需要进行进一步的修饰。
【】 纤维蛋白原受体拮抗剂;融合蛋白;抗血小板聚集活性
【】 Q503 【】 A 【】 1000-50 8(2005)02-0173-06
、 Decorsin
, 27 ,
1 500 , GPIIb-IIIa RGD
[1] [7-9]
。, 。, An-
[2]
。 nv-D39 Annv-D27。Annv-D39 Annexin V
Decorsin, Macrobdella dec- Decorsin , 10
ora , GPIIb-IIIa GGGGSGGGGS,
, 。Decosin 。Annv-D27 Annexin V Decorsin
39 , 6 6 27 。
, RGD (Arg-Gly-Asp, Escherichia coli
--), RGD
[3]
。Annexin V 1990 GPIIb-IIIa 。
Annexins ,
1
()。Ca2+ 1.1 试剂盒以及主要试剂
[ -6]
。 Nco I, BamH I, Sal I, Hind III
Decorsin T DNA MBI Fermentas
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