免疫调节食品功效评价试验分类.pdfVIP

免疫調節食品功效評估 •動物或人體試食試驗 – 吞噬細胞活性 – 自然殺手細胞活性 – 脾臟或淋巴結細胞增殖反應 – 脾臟或淋巴結細胞表型分析 – 抗體分泌實驗? – 細胞激素分泌實驗? 試驗分類 • 細胞免疫試驗 • 非特異性免疫試驗 – Con A/ LPS 刺激脾臟 – 自然殺手細胞活性/ 細胞增生反應 CTL細胞活性 • 體液免疫試驗 – 單核 －巨噬細胞功能 – 抗體分泌實驗 • 免疫毒理試驗 – 細胞激素分泌實驗 – 脾臟/體重 比值 – 脾臟總細胞數 – 脾臟細胞表型分析 1 細胞吞噬力 • See if phagocytes (granulocyte and monocyte) can phagocytose pathogenic bacteriae, ie E. coli. • Bacteria markers: fluorescein. • Leukocyte markers: PI. 細胞吞噬力 2 細胞吞噬力 3 實驗注意項目 • Bacteria storage is important. • Effector cell viability is important. • Discrimination of internal/external bugs – Quenching by icy cold acidic trypan blue soln. – PBS Washing twice. – FACSLyse and one more PBS washing. • Helpful with DNA staining of leukocytes. 細胞吞噬力 4 細胞吞噬力 細胞吞噬力 5 細胞滅菌力 NADPH Oxidase NADPH Oxidase NADPH NADPH O O2 2 - O - NADP O2 NADP 2  SOD SOD H O H O 2 2 2 2 - OH- OH Phagocy