天然产物分离提取实验讲义正文.docVIP

实验一 番茄红素和?-胡萝卜素的提取与分离 番茄中含有红色色素番茄红素和黄色色素?-胡萝卜素，番茄红素具有很强的抗氧化作用，其抗氧化能力为维生素的100倍，同时番茄红素具有显著的抗癌作用，现已查明：番茄红素可以防止前列腺癌，乳腺癌及消化道癌的发生，并可以降低皮肤癌的发病率。?-胡萝卜素是人体不可缺少的维生素的前体物质并具有抗氧化活性。本实验从新鲜番茄中提取天然色素，通过自动层析仪分离番茄红素和?-胡萝卜素 实验仪器：自动层析仪（上海沪西分析仪器厂）； 紫外分光光度计1810（北京普析通用科技有限公司） 实验试剂：95%乙醇，二氯甲烷；苯；氧化铝，石油醚（60-90℃） 实验步骤： 称取10g新鲜番茄，捣碎后置于100mL三口瓶中，加20mL95%乙醇将混合物在水浴上加热回流5min，用纱布将番茄包好，挤出其中汁液，将液体保存于锥形瓶中，固体重新置入三口瓶中加20mL二氯甲烷加热回流5min，抽滤，将滤液与前面的液体合并，将合并液体倒入分液漏斗中，加入10mL饱和食盐水，静置分层，放出下层带颜色的二氯甲烷层，使其流经一个在颈部塞有松软棉花的且在棉花上铺有无水硫酸钠的漏斗，将滤液置于蒸馏装置中蒸发,蒸馏瓶中的残留物为类胡萝卜素粗品，将此粗品用1苯溶解，通过柱色谱分离番茄红素和?-胡萝卜素。 自动层析仪的使用 装柱：拧下层析柱两端的旋钮，注意要将垫片和垫圈保存好，将柱子在热风干燥器上吹干，将下端旋钮旋上，干法装入氧化铝至离上端约有5处，拧上上端旋塞，用木棒轻轻敲打柱体使氧化铝填充均匀， 打开恒流泵，以较大的速度向柱内注入石油醚，当层析柱下端有稳定的液体流出时，关闭恒流泵，拧开层析柱上端旋塞，注入0.2-0.5色素，迅速拧上旋塞，开动恒流泵和自动部分收集器，设定好工作参数，收集样品，待红色?-胡萝卜素全部洗脱后，可用乙醇作洗脱剂洗脱黄色的番茄红素。 将带有红色和黄色的试管在水浴上蒸发至干，得到番茄红素和?-胡萝卜素纯品。 将自制样品用紫外分光光度计扫描，确定最大吸收波长。 思考题： 画出番茄红素和?-胡萝卜素的结构式，指出哪一个极性大。 如何鉴别番茄红素和?-胡萝卜素。 实验二 超临界CO2萃取大豆油及其脂肪酸分析 1. 实验目的 1. 熟悉超临界流体的特性及其应用 2. 掌握超临界流体萃取大豆油的操作方法 3. 掌握气相色谱分析大豆油脂肪酸成分的操作方法 2. 实验原理 超临界流体具有十分独特得物理化学性质，它的密度接近于气体，而扩散系数大、密度小、介电常数大等特点，使其分离效果好，是很好得溶剂。超临界萃取即高压下、合适温度下在萃取缸中溶剂与被萃取物接触，溶质扩散到溶剂中，再在分离器中改变操作条件，使溶解物质析出达到分离目的。 3. 实验仪器与试剂 仪器 HA121-50-01(02)型超临界萃取装置、气相色谱仪，温岭福立9790、氢火焰离子化检测器（FID）32mL/min、空气流速：500mL/min、分流比：1:50。 （2）等温度到设定值后，打开氢气发生器调整氢气流速：50mL/min、灵敏度：109。 （3）点火 （4）打开工作站，查看基线，基线稳定后，调零，开始进样，进样量为1μL，采集数据。 色谱条件： 柱子：强极性柱FFAP脂肪酸分析毛细管柱，0.32х30m,兰州化学所 柱温190℃ 进样器温度230℃ 检测器温度230℃ 载气（氮气）流速：32mL/min 空气流速：500mL/min 氢气流速：50mL/min 分流比：1:50 进样量为1μL 实验三 大豆磷脂酰胆碱的提取 一、实验目的 通过本实验了解从浓缩磷脂中提取磷脂酰胆碱的工艺过程，掌握工艺条件，力求获得得率高，质量好的磷脂酰胆碱。 二、实验原理 利用磷脂酰胆碱能溶于乙醇，而磷脂酰乙醇胺等不溶于乙醇的特性，用乙醇从浓缩磷脂中反复萃取出磷脂酰胆碱，然后再用丙酮萃取其中少量的油脂和脂肪酸，而得到精致的磷脂酰胆碱。 三、实验仪器 旋转蒸发器、台天平、铁架台、真空泵、真空干燥箱、压力表、搪瓷盘、烧杯、量筒、温度计、玻棒。 四、试剂 乙醇、无水丙酮。 五、实验步骤 提取：用台天平称浓缩大豆磷脂20克于250mL烧杯中加20mL乙醇，在水浴上加热至60~70℃，并不断搅拌，使磷脂酰胆碱溶于乙醇中，呈棕黄色停止搅拌，静止片刻将上层含磷脂酰胆碱的乙醇撇去，在加乙醇同样操作4次，直至磷脂酰胆碱大部分溶出为止。 蒸馏：将含有磷脂酰胆碱的乙醇放入旋转蒸发器中，在真空度650~750mmHg、温度35~40℃条件下回收乙醇。无蒸馏物为止，将余下物即磷脂酰胆碱、油、脂肪酸到入250mL烧杯内。 浸洗：将浓缩后的磷脂酰胆碱混合物加入1:1的无水丙酮不断搅拌、浸洗、磷脂酰胆碱中的油和脂肪酸都溶于丙酮中，静止片