第8章紫外可见吸光光度法及分子荧光分析法-精品课程.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 检测器：色谱洗脱液中组分的量(或浓度)转变成电信号 两种基本类型： 通用型检测器 对一般物质均具有的物理或化学特性有响应，有示差折光，蒸发光检测器等。 专属型检测器 只能检测某类物质的某一特征，有紫外、荧光、电化学检测器等。 性能指标：灵敏度、噪音、检测限、线性范围、适用范围等。 5、高效液相色谱检测器 紫外检测器—浓度型、专属型 工作原理：Lambert-Beer定律 特点： （1）灵敏度高 （2）噪音低，线性范围宽 （3）对流速和温度波动不灵敏，适合梯度洗脱。 （4）不破坏样品，可用于制备色谱。 缺点： （1）只能检测具有紫外吸收的物质； （2）流动相有一定限制，流动相的截至波长应小 于检测波长。 ①可变波长检测器 结构和工作原理：与紫外—可见分光光度计类 似，流通池代替比色池。可以按照需要选择组 分的最大吸收波长，灵敏度高。 ②光电二极管阵列检测器 工作原理：与二极管阵列分光光度计相似，是一 种光学多通道检测器。 采用PDAD可同时获得样品的色谱图和每个色谱组分的吸收光谱，称为三维光谱—色谱图。 色谱图用于定量分析，光谱图用于定性分析。 荧光检测器—浓度型、专属型 荧 光 检 测 的 原 理： 特点： （1）灵敏度高，10-10g/ml。 （2）选择性好，检测荧光物质，适合生命 活性物质和体内药物的检测。 （3）不破坏样品，可用于制备色谱。 缺点： 只能检测能产生荧光的物质 色谱技术应用实例 不同成因或沉积环境的原油，在色谱分析所得的化合物组成和含量上一定存在差异。这种差异即称为“色谱指纹”，利用这些指纹的差异可判断油层的连续性及混采油层中各单层产量的贡献。 1、油藏地球化学分析 色谱技术应用实例 1、油藏地球化学分析 色谱技术应用实例 2、煤化工分析 色谱技术应用实例 2、煤化工分析 色谱技术应用实例 3、血液中酒精含量 顶空进样毛细管柱气相色谱法测定血液中酒精含量 色谱技术应用实例 4、环境分析 色谱技术应用实例 4、生物标志化合物分析 色谱技术应用实例 4、生物标志化合物分析 色谱技术应用实例 4、生物标志化合物分析 色谱技术应用实例 4、生物标志化合物分析 色谱技术应用实例 5、气相色谱示踪技术 色谱技术应用实例 5、气相色谱示踪技术 色谱技术应用实例 5、气相色谱示踪技术 如何从头建立一个色谱方法 1、根据待测物的极性，选择色谱柱 待测物极性影响的是你选择的色谱柱，有一个比较通用的原则，叫做“相似相适性”，也就是说可以选择与待测物种类相近的填料进行分析， 非极性：HP－1 弱极性：HP－5 中极性：HP－50 强极性：HP-Inovax 如何从头建立一个色谱方法 2、根据待测物的沸点，选择仪器参数， 色谱柱一般的最高使用温度基本都在350以下，所以对于太高沸点的待测物，就可以很坚定的扔到液相或者其他的检测方法去 进样口：250 炉 温：50－300程序升温 检测器：330 ........ 如何从头建立一个色谱方法 3、根据待测物的性质，选择检测器， FID是最通用的，不过在检测某些物质时与其他检测器不在一个数量级别上。含卤原子较多的化合物用ECD会有极为出色的效果，NPD顾名思义对含有机氮和有机磷的检测非常有帮助 TCD：常量 FID ： ppm ECD：ppb NPD：ppb MS： ppb 如何从头建立一个色谱方法 4、根据检测对象及样品的性质，选择前处理方法 当然当你看到一个漂亮的色谱峰出现在谱图上时，你的工作也只完成了三分之一，根据检测的对象的性质，选择合适的样品前处理方法 气 体：基本不需处理 液 体：萃取 固 体：提取 挥 发 性：顶空 半挥发性：萃取或者提取 待测物性质 待测物性质 固体 样品 干 燥 研 磨 索 式 提 取 器 提 取 旋 转 蒸 发 器 浓 缩 填 充 柱 净 化 氮 吹 GC MS 测 定 固体样品处理流程图 有机污染物的分析方法 水样 真 空 泵 抽 滤 固 相 萃 取 洗 脱 氮 吹 GC MS 测 定 水样处理流程图 有机污染物的分析方法 有机污染物的分析方法 我的一些应用心得 1、在大部分的情况下，我们都是根据实验室的条件来 确定自己一些小的研究方向 2、色谱是一个很强有力的工具，在通常情况下，它能够 和许多学科直接结合 3、色谱分析方法的建立是一个较为繁琐的过程，在大部分 情况下，决定一个好的色谱测定结果的是前处理的好坏。